【摘 要】
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用化学诱导法和显微注射法等细胞工程技术产生皱纹盘鲍二/四倍体嵌合体。化学诱导法在受精后3nin用15mg/L6-DMAP处理15min，以抑制受精卵第一极体释放，获得了四倍体胚胎，并培育获得了担轮幼虫。通过对单个幼虫进行染色体计数检验染色体倍性，表明囊胚期胚胎中存在17.2％的四倍体细胞，而担轮幼虫中四倍体细胞的比例仅为6.6％。而且，囊胚期四倍体细胞有33.9％存在于二/四倍体嵌合体中，而担轮幼
【机 构】
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中国海洋大学海洋生命学院,山东 青岛 266003
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用化学诱导法和显微注射法等细胞工程技术产生皱纹盘鲍二/四倍体嵌合体。化学诱导法在受精后3nin用15mg/L6-DMAP处理15min，以抑制受精卵第一极体释放，获得了四倍体胚胎，并培育获得了担轮幼虫。通过对单个幼虫进行染色体计数检验染色体倍性，表明囊胚期胚胎中存在17.2％的四倍体细胞，而担轮幼虫中四倍体细胞的比例仅为6.6％。而且，囊胚期四倍体细胞有33.9％存在于二/四倍体嵌合体中，而担轮幼虫时期四倍体细胞全部存在于二/四倍体嵌合体中，不存在完全四倍体幼虫。显微注射法当化学诱导四倍体胚胎发育至囊胚前期时，除去卵膜，用胰酶消化，使胚胎细胞分散获得胚胎单细胞。用显微操作技术将四倍体胚胎单细胞移植到正常二倍体囊胚中，获得了嵌合体胚胎。但是显微移植嵌合体胚胎发育停止在囊胚后期，未能获得嵌合体幼虫。化学方法诱导四倍体获得二/四倍体嵌合体不仅证明了二倍体载体法培育皱纹盘鲍二/四倍体嵌合体的技术路线是可行的，而且表明了四倍体胚胎存活率低可能是因为四倍体细胞中染色体丢失，造成完全四倍体不能存活的缘故。四倍体细胞只能存在于二/四倍体嵌合体中，表明通过二倍体载体技术培育二/四倍体嵌合体可能是克服四倍体成活率低和不能附着变态的可行途径。
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