β-内酰胺酶抑制多肽的氨基酸替换以及抑制活性研究

• 作 者: 许明飞;谢丽萍;胡又佳;
• 机 构: 上海医药工业研究院创新药物与制药工艺国家重点实验室 上海 200437
• 出 处: 第十一届全国抗生素(微生物药物)学术会议
• 发表日期: 2009年期

　　目的：检测小肽P1对SHV型β-内酰胺酶的体外与体内抑制作用，并进行氨基酸替换研究其β-内酰胺酶抑制活性的变化。
　　方法：通过PCR．反应在P1的三个位点进行了氨基酸替换，将第1位和第18位上的S和V分别替换为F和Y后，再将第15位上的Y残基被分别替换为A、C、G和R，得到氨基酸替换后的突变小肽P1-A,P1-C,P1-G和P1-R。表达纯化各小肽并测定其对于TEM-1型和SHV型β-内酰胺酶的抑制常数，并以耐β-内酰胺抗生素的肺炎克雷伯氏菌为对象进行体内抑制作用的比较。
　　结果：实验证实小肽P1在体外对TEM-1型和SHV型β-内酰胺酶均有抑制作用；抑制常数显示小肽对于TEM-1型β-内酰胺酶的抑制作用强于SHV型；与原始小肽P1相比，氨基酸替换小肽P1-A对β-内酰胺酶抑制活性提高了2.5倍。相对于P1，小肽P1-A能够显著抑制肺炎克雷伯氏菌在Amp平板上的生长。