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本研究的目的在于明确高致病性蓝耳病病毒(HP-PRRSV)在共感染中对副猪嗜血杆菌(HPS)的影响.根据HPS的一段保守序列(infB基因)设计引物,采用煮沸法从HPS培养物中提取DNA,进行PCR扩增.将鉴定正确的目的 基因片段克隆入pMD 18-T载体中,转化大肠杆菌DH5α,经PCR及测序鉴定后得到阳性重组质粒,作为阳性标准品.通过敏感性、特异性、重复性试验,建立一种准确、快速的检测HPS的荧光定量PCR方法 .选用32头4周龄的猪,随机分成四组,一组用HP-PRRSV滴鼻5d后,腹腔注射HPS;二组单独用HP-PRRSV滴鼻;三组于第5天腹腔注射HPS;四组为对照组,腹腔注射生理盐水.