【摘 要】
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本试验借助显微操作仪分离牛的X和Y染色体,经DOP-PCR(degenerate oligonu-cleotide primer-PCR)扩增后用Biotin-11-dUTP)和CY3-dUTP分别标记以制备牛性染色体荧光原位杂交探
【机 构】
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广西大学动物繁殖研究所,广西亚热带生物资源保护利用重点实验室,广西南宁,530005
【出 处】
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中国畜牧兽医学会2008年学术年会暨第六届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会
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本试验借助显微操作仪分离牛的X和Y染色体,经DOP-PCR(degenerate oligonu-cleotide primer-PCR)扩增后用Biotin-11-dUTP)和CY3-dUTP分别标记以制备牛性染色体荧光原位杂交探针.探针与牛中期染色体、正常精子和流式细胞仪所分离的牛精子进行荧光原位杂交(fluorescencein hybridization,FISH).荧光原位杂交结果显示牛中期染色体的性染色体上有明显的杂交信号；牛正常精子杂交结果显示X精子占47.3％,Y精子占48.7％,接近于正常精子中X、Y精子各占50％的理论值；分离的牛Y精子和X精子杂交结果显示Y精子的纯度为86.2％,x精子的纯度为88.3％,而流式细胞仪重分析的纯度分别为87.6％和90.1％,两种检测方法所得到结果没有显著差异.这表明本试验运用FISH技术成功鉴定了牛分离精子的纯度,该方法的成功建立也为其他分离XY精子的方法所分离的牛精子进行纯度鉴定提供了一套可靠的途径.
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