SSH法结合定量PCR技术研究阉牛与公牛背最长肌的差异表达基因

来源 :中国畜牧兽医学会2008年学术年会暨第六届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:nnnnnnnxxxxx
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阉牛与公牛相比,生长速度减缓,体脂累积加速,肌内脂肪和肉的嫩度增加.分离阉牛和公牛肌肉组织差异表达基因,可为弄清这些差异的机理提供基本信息.本研究利用抑制消减杂交技术(suppression subtractive hybridization,SSH)成功地构建了阉牛和公牛背最长肌间的消减cDNA文库,通过PCR和反Northern筛选,获得了84个差异表达克隆,发现共代表10个ESTs,在牛中均为已知基因.对文库中所包含的肌动蛋白2基因(ACTG2)、原肌球蛋白2基因(TPM2),胰岛样生长因子1基因(IGF-1)进行了实时荧光定量PCR检测,结果显示:ACTG2.TPM2.IGF-1基因在阉牛背最长肌组织RNA池中的表达量,分别为对照的公牛背长肌RNA池中表达量的1.96、2.41、2.89倍,这提示我们,上述基因的上调表达很可能与阉牛肉质特性的形成有密切的关系,可以作为研究该性状的候选基因.
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