【摘 要】
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目的：目前在镉致癌作用机制研究方面有氧化应激、信号通路改变、细胞增殖与凋亡异常、金属硫蛋白缺乏等假说，但这些遗传学假说还不能完全阐明镉的毒性机制.近年来有研究表明表观遗传学特别是DNA甲基化调控机制在镉毒性方面有重要作用.探讨基因组DNA甲基化在镉致癌过程中的作用.方法：建立镉致16HBE细胞恶性转化模型，用5 μ M氯化镉(CdCl2)处理细胞，染毒时间为24小时，每周染毒1次；细胞处理3-4周
【机 构】
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广州医科大学公共卫生学院,广州市,511436
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目的：目前在镉致癌作用机制研究方面有氧化应激、信号通路改变、细胞增殖与凋亡异常、金属硫蛋白缺乏等假说，但这些遗传学假说还不能完全阐明镉的毒性机制.近年来有研究表明表观遗传学特别是DNA甲基化调控机制在镉毒性方面有重要作用.探讨基因组DNA甲基化在镉致癌过程中的作用.方法：建立镉致16HBE细胞恶性转化模型，用5 μ M氯化镉(CdCl2)处理细胞，染毒时间为24小时，每周染毒1次；细胞处理3-4周后，检测细胞生长曲线、细胞增殖和周期分布；并通过软琼脂实验初步判断致癌物是否具有诱导细胞锚着独立性生长的特性，最后根据细胞能否在裸鼠皮下形成肿瘤判定细胞的恶性转化.在细胞恶性转化过程中分别提取染毒不同时间的细胞DNA进行简化亚硫酸氢盐测序法进行全基因组DNA甲基化检测，并用qRT-PCR检测对应细胞DNMT1水平.结果：CdCl2诱导后35代细胞裸鼠皮下形成肿瘤，在镉诱导的恶性转化细胞16HBET中全基因组DNA中C(特别是CG)的甲基化都普遍升高，而CHG和CHH甲基化比例较正常细胞低.DNMT1在恶性转化细胞中表达增加.结论：提示在恶性转化过程中DNMT1介导催化特异性基因启动区DNA C原子甲基化的反应，从而使全基因组DNA甲基化水平增加，参与镉诱导细胞恶性转化过程.
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