酿酒酵母SAM合成酶基因的克隆及表达

• 作 者: 安胜欣;王雅琴;任远;
• 机 构: 北京化工大学生命科学与技术学院,北京 100029
• 出 处: 第五届全国制药工程科技与教学研讨会
• 发表日期: 2006年期

目的：酿酒酵母S-腺苷甲硫氨酸(SAM)合成酶基因在大肠杆菌中的克隆和表达。
方法：以酿酒酵母2B-41的染色体DNA为模板，根据GenBank上已登录的S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因设计特异性引物进行PCR扩增，获得目的基因DNA片断。将此基因克隆到原核表达载体pET-28a并转化大肠杆菌BL21(DE3)。
结果：经IPTG诱导和聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析，有一条约为47kD的外源蛋白条带出现，表达量可达到菌体总蛋白含量的23.3％。目标基因表达产物主要以包涵体的形式存在。
结论：酿酒酵母S-腺苷甲硫氨酸(SAM)合成酶基因可在大肠杆菌中的克隆和表达。