【摘 要】
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目的 短链脂肪酸能够降低结直肠癌发生的风险,而Wnt通路的激活与结直肠肿瘤发生密切相关.本研究通过采用富含丁酸的丁酸梭菌上清液(Clostridium butyricum, CB),对两种人结肠癌细胞系HCT116和Caco-2进行干预,探究丁酸梭菌上清对细胞增殖的影响,以及其中的抑癌机制.方法 应用5％、10％以及20％不同稀释浓度的丁酸梭菌上清液CB (ATCC19398)以及3种不同浓度的丁
【出 处】
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2017中国医师协会消化医师分会年会
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目的 短链脂肪酸能够降低结直肠癌发生的风险,而Wnt通路的激活与结直肠肿瘤发生密切相关.本研究通过采用富含丁酸的丁酸梭菌上清液(Clostridium butyricum, CB),对两种人结肠癌细胞系HCT116和Caco-2进行干预,探究丁酸梭菌上清对细胞增殖的影响,以及其中的抑癌机制.方法 应用5％、10％以及20％不同稀释浓度的丁酸梭菌上清液CB (ATCC19398)以及3种不同浓度的丁酸钠溶液分别干预HCT116和Caco-2 24h、48h和72h,以PBS作为对照组.应用MTT法检测不同干预浓度干预时间的细胞活性,应用RT-PCR和Western blot检测丁酸受体G蛋白偶联受体GPR43和GPR109A的表达情况以及Wnt/β-catenin通路信号的激活情况.所有的数据均采用SPSS17.0进行分析,计量资料用均数±标准差((x)±s),计量资料3组以上组间比较用单因素方差分析,以p＜0.05认为有统计学意义.结果 在Caco-2细胞中,20％的丁酸梭菌上清液在48h开始出现抑癌活性；在HCT116细胞中,5％的丁酸梭菌上清液在24h即出现抑癌活性,且呈现时间和浓度梯度依赖性.用20％的丁酸梭菌上清液干预HCT116细胞48h后,可见GPR43和GPR109A的mRNA和蛋白表达水平均高于对照组,差异有统计学意义.上清液干预组β-catenin核异位表达以及cyclin D1表达均减少.且丁酸梭菌上清液下调了HCT116细胞中促炎因子IFN-γ、IL-1β、TNF-α mRNA的表达.结论 丁酸梭菌上清抑制肠道肿瘤细胞系HCT116和Caco-2的活性,可能是通过上调肠道上皮GPR43和GPR109A的mRNA和蛋白表达,从而抑制Wnt/β-catenin通路信号的活性.本研究在细胞水平上研究了丁酸梭菌抗癌的可能机制.
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