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目的:构建TBC1D15 基因敲除细胞系并进一步研究其功能.方法:(1)SgRNA 序列设计:应用http://crispr.mit.edu/设计针对TBC1D15 第五个外显子的一对最优gRNA,标记为a、b,根据获得的gRNA 序列设计互补引物,并在两端增加BpiⅠ 的酶切位点.