【摘 要】
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目的:本课题拟阐释干性转录因子调控上皮间质转化(EMT)参与肺癌化疗耐药的潜在机制.方法:采用MTT,细胞及组织免疫组化,免疫荧光,蛋白印迹,实时定量PCR结合RNA干扰等实验在体
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目的:本课题拟阐释干性转录因子调控上皮间质转化(EMT)参与肺癌化疗耐药的潜在机制.方法:采用MTT,细胞及组织免疫组化,免疫荧光,蛋白印迹,实时定量PCR结合RNA干扰等实验在体内外进一步明确干性转录因子调控EMT参与肺癌耐药的作用.结果:采用细胞免疫组化实验,比较化疗敏感株A549与耐药株A549/DDP干性调控因子(OCT4和Nanog)及干细胞相关标志物(CD133和ABCG2)的表达情况;RT-PCR及western blot方法检测;利用免疫组织化学方法分析干性转录因子及上皮间质转化标志物(E-Cadherin和N-Cadherin)在104例肺癌组织的表达及与预后和疗效的关系;同时本研究也显示越高表达OCT4,Nanog的肺癌病人预后越差,其中OCT4与预后之间达统计学边缘效应,而Nanog的表达与预后之间达统计学显著差异;该组患者在术后疾病出现进展后共有74例患者进行了进展后的化疗,在这些化疗患者中随访疗效发现,Nanog不表达患者达到PR的较多,Nanog表达患者疗效PD的较多.多因素COX回归分析提示肺癌分期,CD133,N-Cadherin及Nanog是独立的预后因素;干扰RNA结果显示:下调Nanog表达后可一定程度的恢复顺铂耐药株对顺铂的敏感性;结论:本课题的完成将从新的角度揭示肺癌耐药的调控机制,为今后以干性转录因子和EMT相关通路作为逆转肺癌耐药的新靶向提供理论依据.
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