【摘 要】
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目的 旨在探讨恩再适对体外培养人源肿瘤细胞增殖的影响及其对体外小鼠脾脏淋巴细胞分泌细胞因子的作用.方法 以HepG2、LM3、H460、A549、Hela五种人肿瘤细胞为实验对象,利用CCK-8法检测恩再适不同作用浓度(终浓度为1.63、0.815、0.326、0.163、0.0815、0 U/ml)对细胞增殖活性的影响;无菌分离小鼠脾脏,制备脾淋巴细胞悬液并用含10#胎牛血清(FBS)的RPMI
【机 构】
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230032 合肥,安徽医科大学;100850 北京,军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所 10
【出 处】
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中国环境诱变剂学会风险评价专业委员会第二十届全国学术交流会议
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目的 旨在探讨恩再适对体外培养人源肿瘤细胞增殖的影响及其对体外小鼠脾脏淋巴细胞分泌细胞因子的作用.方法 以HepG2、LM3、H460、A549、Hela五种人肿瘤细胞为实验对象,利用CCK-8法检测恩再适不同作用浓度(终浓度为1.63、0.815、0.326、0.163、0.0815、0 U/ml)对细胞增殖活性的影响;无菌分离小鼠脾脏,制备脾淋巴细胞悬液并用含10#胎牛血清(FBS)的RPMI-1640培养基培养,加入刺激剂刀豆蛋白(ConA)或脂多糖(LPS)以及不同浓度的恩再适(终浓度为0.815、0.163、0.0815、0 U/ml)共培养24h,ELISA试剂盒检测上清液中白介素-2(IL-2),干扰素-γ(IFN-γ),白介素-4(IL-4)和白介素-12(IL-12)的分泌水平;利用恩再适(终浓度0.163 U/ml)处理脾淋巴细胞上清液与HepG2细胞共培养24h,CCK-8法检测细胞增殖活性.结果 肿瘤细胞抑制率随恩再适浓度的增加而增加,呈剂量依赖关系,当恩再适浓度达到1.63 U/ml时,对HepG2、LM3、H460、A549、Hela细胞的抑制率分别达到58.95#,55.08#,57.28#,45.80#和48.18#.ELISA结果显示,与对照组相比,低剂量组恩再适对IL-2的分泌水平无显著影响,而中、高剂量组恩再适能显著提高IL-2的分泌水平,高剂量组作用更为显著(P<0.01).中、高剂量组恩再适均能够显著提高IFN-γ和IL-4的分泌水平,中剂量组作用更为显著(P<0.01),而低剂量组恩再适对IFN-γ、IL-4的分泌无显著影响.低、中、高剂量组恩再适对IL-12的分泌水平均有显著提高,中剂量组作用更为显著(P<0.01).恩再适处理的脾淋巴细胞上清液抑制HepG2细胞的增殖,且当上清液体积达到100#时,与相同浓度恩再适单独处理组相比,显著抑制HepG2细胞的增殖(P<0.01).结论 恩再适具有体外抑制所测五种人源肿瘤细胞增殖的作用;另一方面,它对小鼠体外培养的淋巴细胞表现出上调其IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-12等细胞因子的效应,且该效应与其抑制HepG2细胞增殖亦相关.恩再适的抗瘤活性值得深入研究.
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