【摘 要】
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C型凝集素(C-Type Lectin)能够识别异己物质表面的碳水化合物,在无脊椎动物先天免疫中发挥重要作用。本文在已有文库序列的基础上,采用cDNA末端快速扩增(RACE)技术,得到
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C型凝集素(C-Type Lectin)能够识别异己物质表面的碳水化合物,在无脊椎动物先天免疫中发挥重要作用。本文在已有文库序列的基础上,采用cDNA末端快速扩增(RACE)技术,得到了虾夷扇贝(Mizuhopecten yessoensis)C型凝集素(MyCTL)基因cDNA全长。该序列全长646 bp,开放阅读框(ORF) 504 bp,编码167个氨基酸,N端含有一个由20个氨基酸残基组成的信号肽,成熟蛋白中存在可形成两个二硫键的四个保守半胱氨酸残基,一个特异绑定甘露糖类分子的EPN结构域,和两个假定钙结合位点(QDC,WDD),与其他物种的同源性较高。通过实时荧光定量QRT-PCR,将geNorm程序选取的最适内参应用到不同试验体系下,以增加定量结果的准确性和可靠性。结果表明,MyCTL基因在外套膜、肝胰腺、鳃、肾、血、闭壳肌中均有表达,其mRNA相对表达量在外套膜中最高,鳃、肾次之,肝胰腺中最低。注射鳗弧菌(Vibrio anguillarum)的攻毒实验中,其mRNA相对表达量在3h显著上调,6h以后,实验组和对照组的表达差异不显著。受精卵和囊胚期阶段,未发现MyCTL基因的表达,原肠胚到D型幼体期间,mRNA相对表达量持续上升,面盘幼体阶段下降,对变态幼虫的检测则发现该基因表达量剧增。上述结果表明,MyCTL基因在虾夷扇贝免疫和发育过程中起重要作用。
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