论文部分内容阅读
目的：进一步研究表皮细胞的去分化，并探讨Wnt通路在这一过程中的作用机制。
方法：包皮皮片去除皮下脂肪后，中性蛋白酶消化过夜，分离表皮和真皮，分离的表皮片用Ⅳ型胶原反复粘贴并冲洗去除表皮干细胞。处理后的表皮片经免疫组化鉴定后移植到BALB/c裸鼠背部全层皮肤缺损创面，5天后用免疫组化法检测皮片内细胞的表型特征，逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测表皮细胞表型转化过程中Wnts分子及下游分子的表达变化。
结果：未经处理的表皮片基底部细胞呈CK10染色阴性，CK19和β1整合素染色阳性;Ⅳ型胶原处理盾的表皮片内细胞全呈CK40染色阳性。面去基底应片移植后5天，在皮片的基底侧重新出现CK10染色阴性、CK19和β1整合素染色阳性的细胞。同时在移植皮片内Wnt-10b，Wnt-4和Wnt-7a mRNA的表达分别增加了3.1倍、2.2倍和1.4倍，而Wnt通路下游β-catenin、cyclin D1和c-myc蛋白表达分别增加了3倍、1.5倍和2倍(p<0.01).
结论：创伤微环境可诱导表皮细胞去分化，Wnt/β-catenin信号通路可能在这一过程中起关键性的调控作用。