【摘 要】
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目的：基于超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS/MS),建立测定给予高剂量环磷酰胺(CTX)后大鼠尿液中CTX及其代谢产物脱氯乙基环磷酰胺(DCCTX)、4-酮基环磷酰胺(4-KetoCTX)、羧基磷酰胺(CEPM)浓度的方法.方法：大鼠尿液样品经10％甲醇水溶液直接稀释,离心后取上清液,采用UHPLC-MS/MS法进行检测分析.色谱柱：Agilent poroshell SB-C18(2
【机 构】
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宜春学院化学与生物工程学院,宜春 336000;上海长征医院药材科,上海 200003 上海长征医
【出 处】
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2017年中国药学大会暨第十七届中国药师周
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目的：基于超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS/MS),建立测定给予高剂量环磷酰胺(CTX)后大鼠尿液中CTX及其代谢产物脱氯乙基环磷酰胺(DCCTX)、4-酮基环磷酰胺(4-KetoCTX)、羧基磷酰胺(CEPM)浓度的方法.
方法：大鼠尿液样品经10％甲醇水溶液直接稀释,离心后取上清液,采用UHPLC-MS/MS法进行检测分析.色谱柱：Agilent poroshell SB-C18(2.1mm×75mm,2.7μm);流动相：甲醇-10mmol·L-1乙酸铵水溶液,进行梯度洗脱,流速0.25mL·min-1,柱温25℃.采用电喷雾离子源,以多重反应监测模式进行正离子检测.用于定量检测分析的离子对分别为：CTX：m/z261.10→140.10;DCCTX：m/z199.20→78.00;4-KetoCTX：m/z275.10→142.00;CEPM：m/z293.10→221.10;替硝唑：m/z248.10→121.10.
结果：CTX及其代谢产物尿中浓度在40～2000ng·mL-1范围内线性关系良好(CTX、DCCTX、4-KetoCTX、CEPM的r2分别为：0.9915,0.9910,0.9956,0.9918),最低定量限均为40ng·mL-1;日内、日间RSD分别为0.67％～12.76％、1.30％～11.92％;由内标归一化的基质因子计算RSD,结果在0.52％～7.60％之间;该方法的提取回收率为74.00％～102.70％(n=6),方法回收率为85.89％-110.69％(n=5);测定成分和内标的稳定性均良好.
结论：该方法快捷、准确可靠、重复性好,适用于大鼠高剂量CTX给药后CTX及其代谢产物尿药浓度的测定及排泄研究.
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