棉铃虫和烟青虫OBP7羧基端赖氨酸残基参与到结合醛类信息素组分的过程中

来源 :中国昆虫学会2014年学术年会暨学会成立70周年纪念会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:handsomels
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气味结合蛋白(Odorant-Binding Proteins,OBP)是小型的酸性可溶性蛋白,随着各方面实验数据的积累,它们在昆虫嗅觉中的作用得到了科研人员的重视.尽管有些研究结果证实OBPs在信息化学物质的识别过程中是必不可少的,但具体的作用方式仍然有待仔细研究;此外,不同物种、不同种类的配体以及不同种类的OBPs,它们具体的作用方式也不同.本研究中,克隆和纯化了一种OBP(HarmOBP7),Western Blot结果显示这种蛋白专一表达于棉铃虫Hellcoverpaarmlg~和烟青虫Hellcoverpa assulta成虫两性的触角中。荧光结合实验显示HarmOBP7与两种昆虫重要的信息素组分Z-11-hexadecenal和Z-9-hexadecenal结合能力较强,后续一系列的荧光结合实验也显示HarmOBP7对具有13-14个碳链长度的线性醛类、醇类和酯类亲和力较强。为了了解这种蛋白与配体的具体作用方式,构建并表达了缺少羧基端6个氨基酸的突变体HarmOBP7-ml,并进行了不同pH条件(pH3.5-9.5)下的荧光结合实验,结果显示:与野生型相比,HarmOBP7-ml在不同pH条件下对1-NPN亲和力没有发生改变,但与信息素组分及衍生物的亲和力大大降低。随后构建并表达了羧基端的单氨基酸突变体(Lys123/Met123)HarmOBP7-m2,荧光结合实验显示,HarmOBP7-m2对信息素组分及衍生物的亲和力大大降低。上述一系列研究结果表明,Lys123是HarmOBP7配体结合过程中十分重要的氨基酸,可能通过与配体的功能基团形成氢键行使作用。
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