【摘 要】
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目的 观察临床应用剂量下的氯喹(CQ)对肾小管自噬的影响及其肾毒性,为拓展CQ的临床应用奠定基础.方法与结果 ICR小鼠每2d灌胃给予CQ0,5,20和40 mg· kg-1,持续1个月.CQ 40mg·kg-1组中可见肾小管上皮细胞空泡化、水肿、坏死,脱落到管腔,甚至出现裸基膜；肾间质炎症细胞浸润,胶原蛋白增多.随着CQ浓度的升高,肾小管上皮细胞p6蛋白表达和TRPM2蛋白表达变化不大,肾小管上
【机 构】
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浙江大学医学院卫生毒理学,浙江杭州310058
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目的 观察临床应用剂量下的氯喹(CQ)对肾小管自噬的影响及其肾毒性,为拓展CQ的临床应用奠定基础.方法与结果 ICR小鼠每2d灌胃给予CQ0,5,20和40 mg· kg-1,持续1个月.CQ 40mg·kg-1组中可见肾小管上皮细胞空泡化、水肿、坏死,脱落到管腔,甚至出现裸基膜；肾间质炎症细胞浸润,胶原蛋白增多.随着CQ浓度的升高,肾小管上皮细胞p6蛋白表达和TRPM2蛋白表达变化不大,肾小管上皮细胞p62蛋白表达增多,LC3蛋白表达降低.综上所述,本部分研究结果表明,CQ抑制肾小管上皮细胞基础自噬,肾小管上皮细胞发生水肿、坏死.根据ICR小鼠研究结果,选择CQ 20 mg· kg-1作为长期给药的剂量,以饮食限制(DR)诱导自噬和二乙基亚硝胺(DEN)/苯巴比妥(BP)诱导氧化应激进行预处理1周,然后腹腔注射给予CQ,观察CQ作用6个月和8个月后对肾小管上皮细胞自噬的影响.C57小鼠给予CQ20 mg·kg-1 CQ 8个月后,肾间质明显充血,肾小管上皮细胞水肿,体积大,胞浆丰富.CQ给予6个月和8个月时,肾小管上皮细胞p6蛋白表达增加；而TRPM2在6个月时增加不明显,在8个月时明显增加.在6个月和8个月的正常对照组中肾小管上皮细胞的p62和LC3蛋白水平很低.给予CQ 6个月,肾小管上皮细胞的p62和LC3变化不明显,但给予CQ 8个月后,肾小管上皮细胞p62和LC3表达明显增加,肾小管管腔内p62表达明显增加.与CQ组相比,DR+CQ组肾小管管腔内并没有表达p62,肾小管上皮细胞表达p62降低、LC3增加；DEN/BP+ CQ组肾小管及其管腔内的p62表达更多,肾小管LC3表达增加.与CQ组相比较,DEN/BP和DR进行预处理后,CQ并没有使肾小管管腔内表达p62.结论 CQ抑制肾小管上皮细胞自噬,氧化应激可以促进CQ的毒性作用,而促进自噬可以抑制CQ的毒性作用.
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