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本研究通过系列分子重组技术的优化研究，从人类基因组中成功克隆了人甲胎蛋白基因启动子(pAFP)、人甲胎蛋白基因增强子(eAFP)序列全长，并构建了由甲胎蛋白基因启动子(pAFP)、增强子(eAFP)启动的真核基因表达载体，调控治疗基因的表达效率及肝癌细胞的靶向特异性;采用了强效杀伤肿瘤细胞的免疫基因IL-12与自杀基因HSV-TK组合，通过分子重组程序首先将人IL-12基因的两个亚基通过LINKER连接在一起，保证了两个亚基因的同比例表达及三维结构的正确折叠;进而将人IL-12基因与HSV-TK通过内部IRES连接在一起，通过同一启动子的驱动又实现了两个基因应用一个表达载体的同步表达，并构建的了四环素调控基因表达系统调控。HSV-TK-IRES-IL-12联合基因在肝癌细胞内的表达，从优化的分子设计策略与分子重组技术使治疗基因表达同步获得靶向特异性与体外可控性。进一步用于实施肝癌基因治疗过程中基因表达的精确调控建立了分子调控装置。