鹅Ⅲ型干扰素受体的鉴定及组织表达谱的研究

来源 :2015中国第三届水禽疫病防控研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qqbaosongw
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  引言 干扰素是在先天免疫应答中起着重要作用的一类广谱的抗病毒小分子.其中,Ⅲ型干扰素(IFNL)是较新发现的一类干扰素家族,起着和Ⅰ型干扰素类似的抗病毒作用.干扰素抗病毒功能的发挥是经由其与细胞膜上特异性受体结合,而诱发下游一系列小分子的表达,从而发挥抗病毒功能.Ⅲ型干扰素的受体是由一个二聚体组成,其中IL-28α(IFNLR1)是其特异的受体之一.为了更好的了解水禽Ⅲ型干扰素系统,本研究首次克隆了鹅IFNLR1(goIFNLR1),并对其在鹅个体发育过程中的组织分布情况进行研究.材料与方法 本研究利用近缘物种同源区域设计兼并引物PCR扩增基因的部分保守序列,利用RACE克隆技术扩增两侧末端序列,最后用高保真酶进行全长重测序而获得goIFNLR1的cDNA序列,并对其进行一系列的生物信息学的分析;用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)的方法检测goIFNLR1的组织分布情况,并构建其在鹅个体发育过程中的组织表达谱.结果与讨论 经研究,我们克隆得到goIFNLR1共1952bp,其中编码区全长1539bp,共编码512个氨基酸,其中包含20个氨基酸组成的信号肽区域和23个氨基酸组成的跨膜区区域.通过同源比对与跟其他物种的相应基因进行比较发现,鹅IFNLR1的氨基酸序列与鸭和鸡IFNLR1的同源性较高.同时,我们用qRT-PCR方法构建的组织表达谱的结果显示:goIFNLR1主要在上皮细胞聚集的组织如:小肠、肺脏、肝脏与胃具有较高的表达量,且在第二免疫组织哈氏腺和盲肠淋巴结中也具有较高的表达量.这些结果表明goIFNLR1呈现细胞组织依赖的特异性分布,表现在粘膜相关组织中高表达.推测,这也许与IFNL主要在粘膜免疫中发挥抗病毒作用是相关的.本研究为进一步探索鹅goIFNL的抗病毒作用奠定了基础.
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