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目的 探讨人乳腺癌中催乳素受体(prolactin receptor,PRLR)相关的microRNAs(miRNAs)表达谱情况,并对差异表达的miRNAs和novel miRNA进行生物信息学分析以了解其在人乳腺癌的发生和发展中的潜在作用,也为今后miRNAs在乳腺癌细胞的功能研究提供前期工作基础。方法 人重组催乳素(prolactin,PRL)处理PRLR高表达的人乳腺癌T-47D细胞系,利用高通量测序技术检测PRL处理组和未处理组的T-47D细胞miRNA表达谱变化,并对其中差异表达的4个miRNA(miR-449c-5p,miR-16-5p,miR-15b-5p和miR-193a-3p)进行实时荧光定量PCR验证、靶基因预测和GO、KEGG功能富集分析。对获得的3个novel miRNAs(novel-miR-01/02/03)进行RT-PCR表达验证、靶基因进行预测和GO、KEGG功能富集分析。结果 成功构建两组 (PRL处理组和未处理组)人乳腺癌T-47D细胞miRNAs表达谱,分别获得821个和798个miRNAs成熟体,其中428个呈共表达,42个为明显差异表达,实时荧光定量PCR成功验证4个差异表达miRNAs,其细胞内表达与高通量测序结果一致。两组miRNAs表达谱中分别检测出86个和115个novel rniRNAs成熟体,其中46个novel miRNAs在两个库中共表达,进而选择了3个共表达的novel miRNAs进行了RT-PCR表达验证,结果显示两组细胞均呈不同程度的表达。对4个已知miRNAs和3个novel miRNAs的靶基因进行GO、KEGG功能富集分析,提示相关靶基因主要分布于细胞核、胞浆和细胞膜上,其功能主要参与细胞内转录调控、翻译调控及细胞增殖等,涉及Jak-STAT和MAPK等信号通路,与PRLR信号途径密切相关。结论 利用高通量测序技术成功构建人乳腺癌T-47D细胞miRNAs表达谱库,获得了一系列与PRLR信号通路密切相关的miRNAs分子,为后续研究miRNAs分子在乳腺癌发生和发展中的作用奠定重要的基础。同时,也证明了在检测组织细胞miRNAs表达,高通量测序是一项较理想的分析技术。