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目的:建立测定尿液中巴比妥类药物水平[巴比妥(Barbital,bar)、苯巴比妥(Phenobarbital,phe)、异戊巴比妥(Amobarbital,amo)、司可巴比妥(Secobarbital,sec)]的高灵敏度的高效液相色谱-串联质谱联用(HPLC-MS/MS)分析方法.方法:尿液经乙酸乙酯液液萃取处理后,用高效液相色谱-串联质谱联用仪分析.结果:尿液中4种巴比妥类药物在10μg/L～200μg/L浓度范围内呈良好线性,线性相关系数r均大于0.99;加标回收率为91.3％～106.8％; bar、amo、sec的方法检出限为5μg/L; phe的方法检出限为10μg/L;日间精密度、日内精密度rsd均在10％以内.结论:该方法检出限较低、线性范围宽、分析时间较短,可用于检测人体尿液中巴比妥类药物的含量。