【摘 要】
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研究目的：肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)是一种多效生长因子,在牙胚发育过程中起着重要的作用,本实验对其在牙乳头细胞(human dental papilla cells, hDP
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研究目的：肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)是一种多效生长因子,在牙胚发育过程中起着重要的作用,本实验对其在牙乳头细胞(human dental papilla cells, hDPCs)迁移中的作用及机制进行了初步研究.材料和方法：以体外培养的hDPCs为实验对象,phalloidin染色观察HGF对hDPCs骨架的影响,Vinculin免疫荧光观察HGF对hDPCs粘附斑的影响,Transwell小室实验和细胞划痕实验研究HGF对hDPCs迁移能力的影响.运用Western Blot技术研究HGF对hDPCs迁移相关信号分子如p-Paxilllin、p-MLC的表达情况,相关信号通路如p-JNK、p-ERK的激活情况和对RhoA活化的情况.分别采用SP600125、U0126、Y-27632特异性阻断JNK、ERK、ROCK通路后,观察HGF对hDPCs细胞骨架、迁移能力的影响.结果：细胞骨架和Vinculin免疫荧光结果显示：迁移过程中,对照组hDPCs弹力纤维逐渐变细,丝状伪足较多,粘附斑较多而小；经HGF处理后,hDPCs弹力纤维均较粗,片状伪足较多,粘附斑较大而少. Transwell小室实验和细胞划痕实验结果显示HGF促进hDPCs的迁移能力.Western blot结果提示在HGF的作用下,p-MLC,p-Paxilllin的表达明显上调,ERK、JNK、RhoA等与细胞迁移密切相关的通路也均被激活,提示这三个信号通路均参与HGF调节hDPCs迁移能力. SP600125能明显抑制hDPCs的迁移能力,HGF能部分恢复；U0126对hDPCs迁移能力作用不明显；Y-27632能明显抑制hDPCs迁移能力,也能被HGF部分恢复.结论：HGF可明显促进hDPCs的迁移能力,RhoA、JNK通路在其中起到介导作用,ERK通路与HGF促进hDPCs迁移能力关系不密切.
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