【摘 要】
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为提高乳清酸到5-磷酸尿苷酸(UMP)的转化效率,克隆并表达了编码乳清酸磷酸核糖转移酶的基因URA5。根据SGD数据库的资料,设计了URA5的引物,经PCR扩增、酶切后,将URA5连接
【机 构】
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南京工业大学制药与生命科学学院,南京210009
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为提高乳清酸到5-磷酸尿苷酸(UMP)的转化效率,克隆并表达了编码乳清酸磷酸核糖转移酶的基因URA5。根据SGD数据库的资料,设计了URA5的引物,经PCR扩增、酶切后,将URA5连接到表达载体pYX212中,构建了重组质粒pYX212-URA5,然后转化到酿酒酵母S.cerevisiae中进行表达,并对转化乳清酸到5-磷酸尿苷酸的工艺进行初步研究。初步试验结果表明：pYX212-URA5/S.cerevisiae发酵培养40h后以5g/l乳清酸为底物催化反应26小时后,UMP生产量约为2.28g/l。明显高于同等条件下pYX212/S.cerevisiae的UMP生产量0.874g/l。和野生型S.cerevisiae的UMP生产量0.790g/l。
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