【摘 要】
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CPNE5是在人胎脑中首次发现的一个基因.CPNE5所属的Copines蛋白家族是新近发现的一类进化保守的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白.Copines蛋白目前哺乳动物中共发现8个Copines家族
【机 构】
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军事医学科学院基础医学研究所,北京100850
【出 处】
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中国神经科学学会第四次会员代表大会暨第七届全国学术会议(The 7th Biennial Meeting and the
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CPNE5是在人胎脑中首次发现的一个基因.CPNE5所属的Copines蛋白家族是新近发现的一类进化保守的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白.Copines蛋白目前哺乳动物中共发现8个Copines家族成员,CPNE5(copine V)是其中之一.目的 探讨外源表达人CPNE5诱导细胞发生内质网应激反应的机制.我们在前期实验中发现,CPNE5蛋白定位在HEK293细胞的细胞膜和内质网上,并可以引起细胞凋亡的现象.在此我们进一步研究了CPNE5诱导细胞凋亡的具体机制.方法 用脂质体介导法转染,共设两组,对照组转染空载体pcDNA4,实验组即CPNE5组,转染重组质粒pcDNA4-CPNE5.取60%-80%融合生长、状态良好的HEK293细胞,用无血清培养基清洗细胞2次.将质粒5 μg与脂质体10 μL分别与无血清培养基混合,室温静置5 min,再充分混匀两种混合物,室温静置20 min,均匀滴入相应培养皿中,摇匀;37℃培养5h,换完全培养基.继续培养48 h后检测基因表达.细胞转染48 h后,收集5×106个细胞,用TRIzol试剂盒提取总RNA.
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