白藜芦醇通过上调TRIF的抑制因子SARM抑制RSV感染后气道炎症与气道高反应性

来源 :中华医学会第十八次全国儿科学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wei_357
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:呼吸道合胞病毒(RSV)是引起婴幼儿呼吸道感染的最重要的病毒病原体.白藜芦醇(resveratrol)能减轻呼吸道合胞病毒感染小鼠肺部气道炎症及气道高反应性,但其机制尚不清楚.本研究进一步探讨白藜芦醇的抗炎作用是否与其上调TRIF的抑制因子SARM有关.方法:RSV以MOI=10感染9HTEo细胞,western blot方法检测感染后12h,24h,36h,48h,72h SARM水平变化.RSV或紫外线灭活的RSV感染6~8周龄雌性BALB/c小鼠,western blot方法检测感染3,5,7天SARM变化情况;给予BABL/c 6-8周雌性小鼠RSV滴鼻建立RSV感染模型,并在RSV感染1h后给予白藜芦醇30mg/(kg.d)腹腔注射.6~8周龄雌性BALB/c小鼠,随机分为对照组、RSV感染组、白藜芦醇腹腔注射组,western blot检测各组感染后第5天SARM及TRIF水平变化.在RSV感染环磷酰胺(CYP)诱导免疫低下BALB/c小鼠模型中,6~8周龄雌性BALB/c小鼠,随机分为对照组、RSV感染组、白藜芦醇腹腔注射组、SARMsiRNA转染组、SARM siRNA肺泡灌洗液(BALF)中细胞计数(包括总数及分类计数)、肺部病理组织炎症.性对照组,每组5只.4天后SARM siRNA同转染试剂以n/p=7滴鼻转染如小鼠肺部,第5天用western blot的方法检测各组小鼠肺部SARM,TRAM蛋白表达水平,激光共聚焦检测小鼠肺部GFP荧光;检测小鼠清醒状态下气道阻力,研究肺泡灌液(BALF)计细胞总数及分类,组织病理切片评价肺部炎症;ELISA检测BALF中IFN-y的水平.结果:RSV在体内体外实验中均能降低SARM的表达水平,但紫外线灭活的RSV则不能降低BABL/c小鼠肺部SARM表达.而白藜芦醇则可以逆转RSV对SARM的抑制作用.BALF中细胞总数白藜芦醇干预组明显低于RSV感染组,而白藜芦醇干预组与对照组相比差异无显著性,而SARM siRNA转染组明显高于SARM阴性对照转染组,分类计数中,淋巴细胞百分比白藜芦醇干预组较RSV感染组明显降低,而转染SARM siRNA后淋巴细胞百分比升高明显;白藜芦醇干预组清醒状态小鼠气道高反应(吸入乙酰甲胆碱浓度12.5~50.0mg/ml时)较单纯RSV感染组明显减轻,但小鼠肺部转染SARM siRNA后小鼠气道高反应(吸入乙酰甲胆碱浓度12.5~50.0mg/ml时)较SARM siRNA阴性对照组明显升高.HE染色显示RSV感染后肺部细支气管周围、血管周围及肺泡炎症细胞浸润明显增加,白藜芦醇干预后器官周围血管周围炎症减轻,但转染SARM siRNA后炎症明加重.RSV感染后BALF中IFN-y水平较正常对照组明显升高,白藜芦醇干预后IFN-y明显降低,但是SARM siRNA转染后IFN-y水平明显升高.结论:白藜芦醇能够减轻RSV诱发的肺部炎症及气道高反应,其机制可能是通过上调RSV感染后肺部SARM表达水平,抑制TRIF的表达,从而抑制IFN-y,减轻了气道炎症及气道高反应性.
其他文献
会议
会议
会议
会议
目的:本研究目的在于建立荧光定量PCR检测新生儿干血斑标本中CMV-DNA的实验方法,并进行方法学的评价.方法:确立并合成CMV-gB段的引物和探针,构建含该引物扩增的巨细胞病毒(CMV)片段的质粒,检测CMV毒株(AD169株)的浓度.用全血将该病毒株进行10倍的梯度稀释后,滴在滤纸片上制备成干血斑.抽提干血斑的DNA,经荧光定量PCR方法检测获得该方法的灵敏度和最低检测限.通过检测20份同一浓
目的:探讨婴幼儿肺炎支原体肺炎(MPP)的临床、影像学、肺功能及纤维支气管镜特点,提高婴幼儿MPP诊断水平.方法:回顾性分析96例婴幼儿MPP的临床资料,以血清特异性抗体MP-IgM≥1∶160为阳性,提示MP现症感染.结果:婴幼儿MPP以1岁以上多见,全部病例均有咳嗽,多数病例伴发热、痰咳、肺部可闻及干湿性罗音,55.2%伴有喘息,血WBC及CRP多为正常及轻度升高,71.9%有肺外合并症,以心
目的:维生素A干预持续哮喘模型,观察气道炎症的变化特点.方法:36只Balb/c雌性小鼠分为四组:正常对照组、哮喘组、哮喘+中等水平VitA组、哮喘+高水平VitA组.后三组小鼠连续雾化10天,哮喘+维生素A组在雾化后第2天起改喂富含维生素A的饲料.最后一次雾化24小时内进行小鼠肺功能测定,取支气管肺泡灌洗液以进行细胞计数及分类计数.结果:①气道高反应:哮喘组>哮喘+中等水平VitA组>哮喘+高水
目的:CD4+辅助性T细胞亚群Th1/Th2失衡是被公认的哮喘免疫学发病机制,因此着力纠正哮喘患者Th1/Th2平衡失调是哮喘治疗的关键.观察STAT4、STAT6及CBP基因沉默引起的效应变化,以期从基因沉默方向验证STAT4和STAT6是否具有竞争CBP位点的关系.方法:使用阳离子脂质体Lipofectamine(R)LTX,将带有针对基因STAT4、STAT6和CBP的干扰质粒转染入Jurk
目的:探讨不同哮喘控制水平的呼出气一氧化氮(FeNO)及其与儿童哮喘控制测试(C-ACT)、支气管激发试验(BPT)的相关性.方法:选取于2011.3-2011.9于重庆医科大学附属儿童医院哮喘专科门诊就诊的哮喘患儿48名,其中男性30人,女性18人,最小年龄5岁,最大年龄12岁,平均年龄(7.7±1.7)岁.评估过去4周的哮喘症状、治疗情况及肺功能,根据GINA哮喘控制标准分为控制组(n=17例
目的:了解呼吸道病毒混合感染在儿童急性下呼吸道感染中的临床意义.方法:2007年10月至2011年9月,在北京儿童医院住院治疗的临床诊断为急性下呼吸道感染(ALRTI)的患儿1722例,对患儿在就诊当日或次日采集鼻咽吸取物1份,采用逆转录(RT)-PCR方法进行常见呼吸道病毒核酸检测,包括呼吸道合胞病毒(RSV)、鼻病毒(RV)、副流感病毒(PIV)14型、甲型及乙型流感病毒(IFA、IFB)、腺