【摘 要】
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目的 探讨DNA甲基化对miRNA表达水平的影响,以及与食管癌发病间的联系,以寻找可用于食管癌早期诊断、治疗以及判断预后的分子标志物.方法 提取手术切除的20例食管癌组织及其相应癌旁组织中的总RNA和总DNA,将提取出的DNA进行亚硫酸盐修饰及纯化,再利用巢式甲基化特异PCR方法检测miR-218-1启动子区的DNA甲基化状态.提取的总RNA利用实时荧光PCR的方法检测20例癌组织和相应癌旁组织中
【机 构】
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东南大学公共卫生学院环境医学工程教育部重点实验室,江苏南京210009
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目的 探讨DNA甲基化对miRNA表达水平的影响,以及与食管癌发病间的联系,以寻找可用于食管癌早期诊断、治疗以及判断预后的分子标志物.方法 提取手术切除的20例食管癌组织及其相应癌旁组织中的总RNA和总DNA,将提取出的DNA进行亚硫酸盐修饰及纯化,再利用巢式甲基化特异PCR方法检测miR-218-1启动子区的DNA甲基化状态.提取的总RNA利用实时荧光PCR的方法检测20例癌组织和相应癌旁组织中miR-218表达水平.结果 两株食管癌细胞株(EC9706,EC109)表现出了完全甲基化.20例食管癌组织中总体甲基化率为80％(16/20),对应癌旁组织中总体甲基化率为35％(7/20).两者之间的差异有统计学意义(P＜0.05).而20对食管癌组织样本miR-218的表达水平明显低于其相应癌旁组织(P＜0.05).于此同时甲基化的组织中miR-218的表达水平明显低于未甲基化组织(9.98±1.78vs 8.80±1.82,P＜0.05).结论 食管癌中miR-218-1的高甲基化是频发事件,可能是miR-218低表达的重要原因,因而是食管癌的发生、发展的潜在标志物.
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