【摘 要】
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目的 研究转化生长因子β激活激酶1 (TAK1)基因在三氯乙烯(TCE)所致小鼠接触性超敏反应(CHS)中的作用.方法 在ER-TAK1fl/fl小鼠双侧耳背部涂抹他莫西芬(TMA),局部敲除TAK1基因,以不涂抹TMA的ER-TAK1fl/fl小鼠作为野生型对照；此外,还用到在树突状细胞(DC)中特异性敲除TAK1基因的CD11c-TAK1fl/fl小鼠,以CD11c-TAK1wt/wt小鼠作为
【机 构】
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北京大学医学部公共卫生学院毒理系食品安全毒理学研究与评价北京市重点实验室,北京100191
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目的 研究转化生长因子β激活激酶1 (TAK1)基因在三氯乙烯(TCE)所致小鼠接触性超敏反应(CHS)中的作用.方法 在ER-TAK1fl/fl小鼠双侧耳背部涂抹他莫西芬(TMA),局部敲除TAK1基因,以不涂抹TMA的ER-TAK1fl/fl小鼠作为野生型对照；此外,还用到在树突状细胞(DC)中特异性敲除TAK1基因的CD11c-TAK1fl/fl小鼠,以CD11c-TAK1wt/wt小鼠作为野生型对照.每种基因型动物均随机分为3组,每组4只,分别为AOO溶剂对照组、80％TCE组和0.2％2,4-二硝基氟苯(DNFB)阳性对照组.实验第1,2,3天分别于小鼠双侧耳背部涂抹25 μl TCE,第5天经腹腔注射0.5 ml 10 mg·ml-1 BrdU溶液,第6天处死小鼠,取双侧耳后淋巴结,进行淋巴细胞计数和BrdU含量测定,比较各组小鼠淋巴细胞增殖和刺激指数(SI)的差异,观察TAK1对TCE所致CHS发病的影响,同时用流式细胞仪检测淋巴结内CD4+T细胞与CD8+T细胞的细胞比例和细胞数,观察TAK1敲除对淋巴结中T细胞功能的影响.结果 在不涂抹TMA的ER-TAK1fl/fl野生型对照小鼠中,80％ TCE组和0.2％ DNFB组的刺激指数SI分别为1.81和2.72,均超过判断致敏性阳性的临界值1.6；局部敲除TAK1基因小鼠的80％TCE组和0.2％ DNFB组的刺激指数SI分别为0.79与1.45,均低于1.6,并且与野生型对照小鼠相比SI值明显降低,差异具有统计学意义(P＜0.01)；淋巴结内CD4+/CD8+T细胞比例无变化,但致敏期的总淋巴细胞数明显降低.在CD11 c-TAK1 wt/wt野生型对照小鼠中,80％ TCE组和0.2％ DNFB组的SI分别为1.98和3.22,均超过1.6；DC中特异性敲除TAK1基因后,80％TCE组和0.2％DNFB组小鼠的SI分别为0.98与1.05,均低于1.6,并且与野生型对照小鼠相比SI值明显降低,差异具有统计学意义(P＜0.01)；淋巴结内CD4+/CD8+T细胞比例无变化,但致敏期的总淋巴细胞数明显降低.结论 局部和DC特异性敲除TAK1基因均可以抑制TCE所致小鼠CHS反应和致敏期T细胞的增殖功能,提示局部或DC特异性抑制TAK1基因可能成为治疗TCE所致CHS型免疫疾病的潜在靶点.
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