【摘 要】
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血管紧张素转化酶(Angiotensin-I-Conveting-Enzyme,ACE)是一种膜结合的羧基外肽酶,主要存在于哺乳动物的肺部,其能够引起血管收缩,导致血压升高.本研究以新鲜猪肺为原料
【机 构】
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集美大学食品与生物工程学院 福建厦门361021
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血管紧张素转化酶(Angiotensin-I-Conveting-Enzyme,ACE)是一种膜结合的羧基外肽酶,主要存在于哺乳动物的肺部,其能够引起血管收缩,导致血压升高.本研究以新鲜猪肺为原料,通过含盐缓冲液多次匀浆粗提,同时结合DEAE-Sepharose阴离子交换层析、Phenyl-Sepharose HP疏水层析和Sephacryl S-200凝胶层析分离纯化得出ACE.SDS-PAGE结果显示该酶的分子质量约为180 kDa.运用肽质量指纹图谱对纯化的目的蛋白进行鉴定,得到二级质谱肽段17个,共293个氨基酸,与野猪(Sus scrofa)ACE序列一致性为100％,证明纯化的蛋白为ACE.酶学性质表明,该酶在最适温度约为40℃,-30℃下保存三个月酶活力仍保持稳定；最适pH约为8.0,在中性及弱碱性范围内稳定.本实验采用低成本原料,并使用钠盐匀浆粗提法代替长久沿用的高浓度硫酸铵盐析法,获得了高纯度、高价值、高稳定性的ACE,为制备功能性ACE抑制肽奠定了研究基础.
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