【摘 要】
：
本研究通过RACE技术获得粪类圆线虫RIO3蛋白激酶的全长cDNA序列,全长1765bp,预测CDS序列长1521bp,编码506个氨基酸,其中5’-UTR为179bp,3’-UTR为65bp,同时与通过Long-PCR获得的gDNA的序列比较发现,该基因不含有内含子结构.RT-PCR显示Ss-rio3基因在感染性L3幼虫中转录水平最高,而在自由生活的L1期幼虫中转录水平最低.通过Genome W
【机 构】
：
农业微生物国家重点实验室华中农业大学动物医学院 Department of Pathobiolog
【出 处】
：
中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第七次代表大会暨第十二次学术研讨会
论文部分内容阅读
本研究通过RACE技术获得粪类圆线虫RIO3蛋白激酶的全长cDNA序列,全长1765bp,预测CDS序列长1521bp,编码506个氨基酸,其中5’-UTR为179bp,3’-UTR为65bp,同时与通过Long-PCR获得的gDNA的序列比较发现,该基因不含有内含子结构.RT-PCR显示Ss-rio3基因在感染性L3幼虫中转录水平最高,而在自由生活的L1期幼虫中转录水平最低.通过Genome Walker,获得了Ss-rio3基因的启动子序列,并构建了转基因质粒.通过转基因试验,发现Ss-rio3基因启动子可以驱动gfp报告基因表达在L1-L2幼虫头部神经节和肠道组织,且在肠道组织中表达量最高,其与C.elegans riok3的表达形式类似.研究结果阐明了粪类圆线虫rio3基因的基因结构,在不同时期的表达水平及在特异组织中的表达情况,为后续的功能研究奠定了坚实基础.
其他文献
本研究以来自于沈阳地区散养的52份犬的粪便样品和沈阳地区某警犬基地犬152份粪便样品作为实验材料,利用粪便基因组提取试剂盒提取基因组,以此为模板利用蓝氏贾第虫TPI基因片段的高特异性引物进行巢式PCR扩增.通过对PCR产物的序列进行比对分析,发现了共计27个阳性样品,7种基因亚型,其中散养犬的样品中检测到10个阳性样品,感染率为30.77％,警犬基地犬的样品中检测到17个阳性样品,感染率为9.87
本研究利用改进的DMEM培养基体外培养结肠小袋纤毛虫滋养体,将不同浓度的中草药煎剂加入其中,采用机率单位法,计算不同中草药抗结肠小袋纤毛虫的半数致死浓度(LC50),并进行比较.结果从30种中草药中筛选出半数致死浓度低于l00g/L 16种,半数致死浓度(LC50)由低到高的顺序是常山、五倍子、乌梅、葛根、百部、二花、甘草、黄芩、知母、槟榔、苦楝皮、诃子、贯众、使君子、巴豆和青蒿,这些中草药品种可
本研究对分析新孢子虫基因组获得的含有SRS结构域的40-KD表面抗原(NcP40)基因进行了原核表达和纯化,结果显示NcP40在E.coli中成功表达,且纯化结果良好,终浓度为3.07mg/ml.经Western-blot分析NcP40与弓形虫血清没有交叉反应,为新孢子虫特异性抗原.以纯化好的NcP40作为抗原建立新孢子虫间接ELISA检测方法并对ELISA条件进行了优化,优化结果为NcP40-E
本研究扩增获得GRA 11和GRA6,测序与结构分析发现,GRA 11基因全长2322bp,无内含子,分子量约为82.817kDa,共有碱性氨基酸121个,酸性氨基酸99个,存在信号肽和跨膜区；GRA6全长为582-bp,无内含子,分子量约为19kDa,存在信号肽和跨膜区.分别将GRA 11和GRA6插入原核表达载体pE-T28a和pGEX-6p-1,表达、纯化蛋白,经鉴定后,分别免疫BABL/c
本研究通过ToxoDB数据库和生物信息学方法获得一个与弓形虫致密颗粒基因(TgGRA14)较高同源的新孢子虫基因,对该新基因进行克隆、测序,并命名为新孢子虫GRA 14(NcGRA 14).为研究新孢子虫GRA 14在入侵宿主细胞时的分泌表达和定位情况,通过原核表达NcGRA14并制备鼠源多抗,以Western blot对该蛋白进行虫体内源性鉴定,以间接免疫荧光技术对该蛋白在虫体入侵不同时间段分泌
本研究通过对新孢子虫基因组数据库的分析、筛选,发现并调取了NCLIV_069640基因,进一步分析发现,NCLIV_069640基因大小为2565bp,有一个开放性阅读框,无内含子,包含1个信号肽及4个跨膜区.大部分氨基酸暴露在蛋白表面,推测具有良好的抗原性.对该基因进行原核表达和纯化,得到与GST融合表达的NCLIV_069640重组蛋白.免疫BALB/c小鼠,制备高滴度抗血清,经Western
为了解肉鸽养殖场鸽源禽毛滴虫T.Gallinae的感染现状及流行特征,对山东省泰安、莱芜和德州等地市的多个肉鸽养殖场及宰鸽场的25000只肉鸽进行随机抽样,采用培养、镜检虫体法,调查这些地区鸽毛滴虫病的感染情况和发病情况；并对分离到的T.Gallinae的分子标记核糖体ITS基因进行了扩增和测序,应用CLUSTALX软件与国内外已发表的鸽源禽毛滴虫ITS基因进行了序列分析,并构建基于ITS的系统发
本试验对56只T.gallinae阳性的鸽子口腔棉拭子进行了细菌分离,采用Vitek全自动微生物分析仪对分离到的不同菌株进行鉴定并对其耐药性进行检测,对细菌的耐药性分析发现,分离到的6株肺炎克雷伯杆菌大多存在较强的耐药性,其仅对厄他培南、亚胺培南、美罗培南等极少数药敏感,这无疑给临床治疗细菌感染造成了巨大的阻碍.故此,鸽子口腔细菌及高耐药性菌株的存在无疑是造成鸽子发生继发性细菌感染的一个潜在威胁,
为构建应用于酵母双杂交系统的牛肝脏组织cDNA文库,试验提取牛肝脏组织的总RNA,运用SMA-RT和LD-PCR技术合成cDNA,并与文库线性载体pGADT7-Rec共转化酵母菌Y187中,构建酵母双杂交c-DNA文库.文库滴度高达5×108cfu/mL,插入片段集中在1-2 kb之间,具有较好的多态性,随机挑取的20个克隆测定重组率为90％.较高的库容量、较长的插入片段以及较高的重组率保证了文库
Cryptocaryon irritans a holotrichous ciliate is a marine fishe parasite,which can infect almost all kinds of marine fishe species and cause significant economic losses.Transforming growth factor:β act