【摘 要】
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为了研究凡纳滨对虾热休克蛋白70 (HSPT0)在白斑综合征病毒(WSSV)感染中的作用,基于热休克蛋白的结构,将HSP70分为两段HSP70A和HSP70P,分别克隆至表达载体pBAD/gⅢA中,构
【机 构】
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中国水产科学研究院黄海水产研究所,山东 青岛 266071
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为了研究凡纳滨对虾热休克蛋白70 (HSPT0)在白斑综合征病毒(WSSV)感染中的作用,基于热休克蛋白的结构,将HSP70分为两段HSP70A和HSP70P,分别克隆至表达载体pBAD/gⅢA中,构建的重组载体转入到大肠杆菌Topl0感受态细胞中,经L-阿拉伯糖诱导,采用SDS-PAGE及Western blot分析,结果表明重组蛋白HSP70A和HSPT0P得到表达.经CO2+亲和层析纯化获得电泳纯目的蛋白.Far western分析表明,HSP70A和HSP70P与重组表达的VP24、VP26有相互作用,ELISA结果说明在设定浓度范围内,HSP70A和HSPT0P与VP24、VP26的作用与浓度成正相关.间接免疫荧光分析表明,HSP70与VP24、VP26共定位于对虾血细胞上.VP24、VP26与HSPT0作用减少HSP70的ATP活性.该研究为深入研究HSPT0在WSSV感染中的作用提供依据.
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