【摘 要】
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卵母细胞分泌的BMP15和GDF9是卵泡生长发育和卵巢功能的重要调节因子.可通过调控Smad信号通路影响卵丘细胞的增殖与凋亡.有研究表明BMP15和GDF9可以影响miR-375的水平,而miR-375的靶基因是BMP15和GDF9的Ⅱ型受体BMPR2,但BMP15/GDF9-miR-375-BMPR2通路是否及如何调控Smad信号通路影响牛卵丘细胞增殖与凋亡尚不清楚.本研究首先通过COCs获得卵
【机 构】
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吉林大学动物科学学院,吉林长春,130000
【出 处】
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2017第四届中国肉牛选育改良与产业发展国际研讨会
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卵母细胞分泌的BMP15和GDF9是卵泡生长发育和卵巢功能的重要调节因子.可通过调控Smad信号通路影响卵丘细胞的增殖与凋亡.有研究表明BMP15和GDF9可以影响miR-375的水平,而miR-375的靶基因是BMP15和GDF9的Ⅱ型受体BMPR2,但BMP15/GDF9-miR-375-BMPR2通路是否及如何调控Smad信号通路影响牛卵丘细胞增殖与凋亡尚不清楚.本研究首先通过COCs获得卵丘细胞,在体外培养过程中添加适当浓度的BMP15和GDF9,采用CCK-8法和流式细胞术明确BMP15/GDF9对牛卵丘细胞增殖与凋亡的影响.随后,合成miR-375mimics、miR-375inhibitor和BMPR2siRNA,进行转染处理,通过Western Blot检测转染前后BMP15/GDF9的I型受体ALK4、ALK5、ALK6的表达变化.100ng/ml的BMP15、200ng/ml的GDF9、50ng/ml的BMP15和100ng/mL的GDF9的联合添加能有效抑制牛卵丘细胞凋亡、促进细胞的增殖.BMP15/GDF9可负调控miR-375的表达水平,正调控BMPR2的表达水平.高水平的miR-375和BMPR2的抑制可导致ALK4表达量升高;而抑制miR-375则可得到相反的结果.BMP15、GDF9具有协同效应,可通过miR-375影响I型受体ALK4和Ⅱ型受体BMPR2的表达水平,进而影响卵丘细胞的增殖、扩散及凋亡.
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