鹅TLR21的分子克隆、生物信息学分析及其免疫学特性研究

来源 :2015中国第三届水禽疫病防控研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dengsanhua
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
  引言 Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)是机体内一类重要的病原识别受体,能识别入侵机体的病原微生物的核酸或结构蛋白或其它成分,从而启动机体固有免疫应答并影响适应性免疫的产生.TLR21是近年来新发现的一种禽类与鱼类等低等脊椎动物特有的TLR,发挥着类似哺乳动物TLR9的免疫识别功能.本研究克隆了四川白鹅Toll样受体家族TLR21的cDNA全序列,对其进行了生物信息学分析,且利用半定量RT-PCR和定量RT-PCR方法构建了其在成年鹅与雏鹅体内的组织表达谱,同时对其免疫学特性进行了探索.材料与方法 实验所用四川白鹅由四川农业大学水禽养殖场提供.免疫刺激剂Poly(I:C)购于Sigma公司,R848、Imiquimod和ODN2006购于Invivogen公司.本研究主要利用兼并引物PCR及RACE技术得到鹅TLR21全长cDNA序列,利用半定量RT-PCR和定量RT-PCR方法构建了TLR21的组织表达谱.选择鹅外周血淋巴细胞与脾单核细胞为细胞模型,择Poly(I:C)、R848、Imiquimod和ODN2006为激动剂,利用定量RT-PCR方法检测TLR21的转录水平,及通路下游的IL-6、IL-1β、IFN-α与IFN-γ的转录水平的变化.结果与讨论 本研究克隆得到鹅TLR21包含一个完整的开放阅读框,编码975个氨基酸,其信号肽位于第1到35位,跨膜区位于第757位到779位,高度保守TIR结构域位于第809位到951位.对其表达组织谱的构建发现:鹅哈德氏腺及胸腺等免疫功能相关组织中TLR21转录水平较高.推测,这其发挥抗感染免疫功能密切相关.免疫刺激剂ODN2006能够有效的刺激鹅TLR21的表达并诱导下游的IL-6、IL-1β、IFN-α和IFN-γ的显著上调;而Poly(I:C)对TLR21表达量无影响,但能上调IL-6和IFN-α的表达.综上,本研究为鹅体内抗病毒固有免疫相关研究奠定基础.
其他文献
液液萃取分离过程作为一种有效的分离方法,应用范围极为广泛。离子液体(ILs)相比常规有机溶剂,具有几乎不挥发以及对很多无机和有机化合物表现出良好的溶解性等独特的性质,在萃取分离过程中的应用正得到大力的发展,尤其是对于化工生产中的一些难分离体系。评价溶剂萃取性能的重要参数是溶剂的分离选择性。无限稀释活度系数(γ_i~∞)是化学工程中重要的热力学参数之一,能够反映溶剂对溶质的溶解度和选择性。测定溶质在
会议
杜牧诗意图129cm×51cm纸本设色1207年天津博物馆藏款识:远上寒山石径斜,白云深处有人家。停车坐爱枫林晚,霜叶红于二月花。乾隆辛未小春臣邹一桂恭写。停车枫阪坐移时,霜叶
云芝糖肽(PSP)是从云芝(Trametes versicolor)COV-1菌株深层发酵培养的菌丝体中提取的肽结合多糖,是国家II类新药,用于减轻癌症病人化、放疗产生的毒副作用、提高自身免疫力,并用于增强亚健康人群机体免疫力。但云芝糖肽对已存在过度免疫状态机体的作用及机理尚不明确。本研究用LPS刺激的小鼠巨噬细胞Raw264.7作为炎症模型,分析PSP对静息和LPS过度刺激两种不同状态的巨噬细胞
直接染料由于分子结构中含有阴离子水溶性基团如磺酸基、羧酸盐等,容易导致其湿摩擦牢度差;活性染料尽管染料和纤维之间以共价键结合,但是染色中存在水解染料、共价键不稳定以
本文以聊城大学果树种植园果树—“黄金冠”桃为试验材料,研究其光合特性、采后生理生化性质、不同方式贮藏下果实理化性质的变化。试验中观察夏季“黄金冠”桃果树的光合作