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引言 Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)是机体内一类重要的病原识别受体,能识别入侵机体的病原微生物的核酸或结构蛋白或其它成分,从而启动机体固有免疫应答并影响适应性免疫的产生.TLR21是近年来新发现的一种禽类与鱼类等低等脊椎动物特有的TLR,发挥着类似哺乳动物TLR9的免疫识别功能.本研究克隆了四川白鹅Toll样受体家族TLR21的cDNA全序列,对其进行了生物信息学分析,且利用半定量RT-PCR和定量RT-PCR方法构建了其在成年鹅与雏鹅体内的组织表达谱,同时对其免疫学特性进行了探索.材料与方法 实验所用四川白鹅由四川农业大学水禽养殖场提供.免疫刺激剂Poly(I:C)购于Sigma公司,R848、Imiquimod和ODN2006购于Invivogen公司.本研究主要利用兼并引物PCR及RACE技术得到鹅TLR21全长cDNA序列,利用半定量RT-PCR和定量RT-PCR方法构建了TLR21的组织表达谱.选择鹅外周血淋巴细胞与脾单核细胞为细胞模型,择Poly(I:C)、R848、Imiquimod和ODN2006为激动剂,利用定量RT-PCR方法检测TLR21的转录水平,及通路下游的IL-6、IL-1β、IFN-α与IFN-γ的转录水平的变化.结果与讨论 本研究克隆得到鹅TLR21包含一个完整的开放阅读框,编码975个氨基酸,其信号肽位于第1到35位,跨膜区位于第757位到779位,高度保守TIR结构域位于第809位到951位.对其表达组织谱的构建发现:鹅哈德氏腺及胸腺等免疫功能相关组织中TLR21转录水平较高.推测,这其发挥抗感染免疫功能密切相关.免疫刺激剂ODN2006能够有效的刺激鹅TLR21的表达并诱导下游的IL-6、IL-1β、IFN-α和IFN-γ的显著上调;而Poly(I:C)对TLR21表达量无影响,但能上调IL-6和IFN-α的表达.综上,本研究为鹅体内抗病毒固有免疫相关研究奠定基础.