【摘 要】
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目的:构建血管内皮生长因子受体3(VEGFR3)逆转录病毒载体,并使其在HepG2入肝癌细胞内稳定表达。方法:采用PCR技术扩增VEGFR3片段,克隆至逆转录病毒载体质粒pBABE-puro中,构建重组质粒pBABE-puro-VEGFR3,经PCR、酶切、测序验证后,体外将重组质粒与PIK包装质粒共同转染人胚胎肾上皮细胞系293FT细胞,包装获得携带VEGFR3基因的重组逆转录病毒,感染人肝癌H
【机 构】
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广州中医药大学深圳附属医院深圳市中医院,深圳518033 华中科技大学同济医学院附属同济医院,武汉
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目的:构建血管内皮生长因子受体3(VEGFR3)逆转录病毒载体,并使其在HepG2入肝癌细胞内稳定表达。方法:采用PCR技术扩增VEGFR3片段,克隆至逆转录病毒载体质粒pBABE-puro中,构建重组质粒pBABE-puro-VEGFR3,经PCR、酶切、测序验证后,体外将重组质粒与PIK包装质粒共同转染人胚胎肾上皮细胞系293FT细胞,包装获得携带VEGFR3基因的重组逆转录病毒,感染人肝癌HepG2细胞,获得转入VEGFR3的HepC2细胞,通过QPCR和Western blot进一步验证VEGFR3在HepG2细胞内的表达。结果:(1)成功获得携带VEGFR3基因的重组质粒pBABE-puro-VEGFR3和人肝癌细胞株HepG2-pBABE-puro-VEGFR3;(2)QPCR和Western blot分别检测到VEGFR3在靶细胞HepG2-pBABE-puro-VEGFR3中的表达。结论:成功构建了携带VEGFR3基因的重组逆转录病毒载体,携带VEGFR3的靶细胞(HepG2-pBABE-puro-VEGFR3)能够稳定表达VEGFR3蛋白。
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我院作为国家中医临床研究基地建设单位，肝病是基地重点病种。本文主要结合我院临床科研信息共享系统的运用，探讨肝病模板制作的思路与方法。
目的:通过含薏苡仁药物血浆体外刺激乙肝相关性肝癌患者外周血树突状细胞(DCs),观察其表型及功能变化,探讨中药对乙肝相关性肝癌患者外周血DCs抗原提呈能力的影响。方法:提取HBV相关性肝癌患者外周血中的PBMCs,以DCs贴壁生长的特性及磁性细胞分离技术(Magnetic Activated Cell Sorting,MACS),并通过肝癌组织裂解物作为抗原刺激获取成熟DC,建立自体DCs、T细胞
目的:探讨荣肝合剂对刀豆蛋白A(ConA)介导的慢性免疫性肝损伤小鼠的病理组织学及肝细胞凋亡的影响。方法:HBV转基因小鼠69只,随机分为空白组10只(尾静脉注射PBS)和ConA造模组59只,采用ConA尾静脉注射造模制作慢性免疫性肝损伤模型。造模结束后,将所有ConA造模组小鼠随机分为模型组、荣肝合剂组、茵陈组、茵陈蒿汤组及联苯双酯组,空白组与模型组给予蒸馏水灌胃,各给药组小鼠每日灌胃给予相应
目的:研究刀豆蛋白A (ConA)刺激小鼠T淋巴细胞表达纤维化蛋白(FBRS)的分子信号机制。方法:实时荧光定量PCR检测ConA刺激不同时间后FBRS的mRNA表达水平,Western blot检测ConA刺激不同时间后FBRS的蛋白表达水平,以及信号通路阻滞剂对FBRS的蛋白表达的影响和ConA对ERK表达的活化作用。结果:ConA能刺激小鼠淋巴细胞的FBRS的mRNA和蛋白表达,在ConA刺
终末期肝病(失代偿期肝硬化、肝衰竭及肝癌)其病机根本为阳气衰微，“阳化气，阴成形”阳气不振，气化不能，导致阴血、痰涎、水湿、瘀血等阴邪凝聚成形，进一步阻遏阳气，耗伤阳气，导致病情进一步进展加重。所以对终末期肝病患者的治疗应注重扶阳，水为阴邪，非阳不化，水湿不化，腹水难消，而肝癌因“积之始生，得寒乃生，厥乃成积矣”，阳虚寒凝为其病机，治疗上应本着“有阳则生，无阳则死”的原则，以温补阳气为肝癌尤其是晚
慢加急性肝衰竭是严重威胁患者生命的疾病，经过多年的研究，在治疗方面已经取得了很大的进步，但是病死率的降低仍有很大的空间。目前西医尚缺乏特效的治疗药物，普遍认为人工肝、肝移植是治疗肝衰竭的有效办法，但是血浆紧缺、医疗费用巨大、肝源有限以及排斥反应等不足极大地限制了该技术的广泛应用。中国目前为发展中国家，人民生活水平不高，医疗保障还不能完全解决医疗费用支付，减少医疗费用的支出是当前重要问题，因此，从中
目的:观察在现有治疗的基础上配合DSG-Ⅱ型肝病治疗仪治疗乙型肝炎后肝纤维化及肝硬化的疗效。方法:将120例乙肝后肝纤维化及肝硬化患者随机分为治疗组80例(肝郁血瘀69例,肝肾阴虚11例);对照组40例(肝郁血瘀34例,肝肾阴虚6例).治疗组为肝病治疗仪加基础治疗组,对照组为基础治疗组。基础治疗包括常规保肝、降酶、抗病毒。结果:治疗后2组在症状方面均得到明显改善,治疗组优于对照组(P0.05)。在
目的:观察解毒化瘀颗粒对慢性重型肝炎患者血清中TNF-α、IL-6、IL-10、IL-12表达的影响。方法:将110例慢性重型肝炎患者随机分为对照组55例、治疗组55例,对照组采用西医基础治疗和对症支持治疗,治疗组在对照组的基础上加用解毒化瘀颗粒,检测两组患者治疗前后TNF-α、IL-6、IL-10、IL-12的变化情况并进行比较。结果:治疗组患者在治疗后第2周、4周、8周血清中TNF-α、IL-
目的:观察原发性肝癌TACE术后应用中药汤剂在改善患者临床症状、生存质量等方面的疗效。方法:随视选取医院2011年7月至2012年7月间原发性肝癌住院患者59例,其中,对照组29例,为单纯应用TACE治疗患者;治疗组30例,为TACE术后应用自拟中药汤剂(中药治疗方法拟益气扶正,解毒化瘀,软坚散结为治疗原则,并根据病情随症加减,每日一剂,水煎早晚分服)治疗患者。观察患者两组患者的AFP(术前及术后
目的:观察不同浓度外源性AFP对AFPsiRNA-HepG2细胞(AFP表达缺失HepG2细胞系)的增殖与凋亡的影响。方法：体外培养AFPsiRNA-HepG2细胞,将细胞分为对照组,100ug/ml,10ug/ml,1ug/ml,0.1ug/ml,0.01ug/mlAFP6组,MTT法检测细胞增殖;Annexin V-FITC/PI染色,流式细胞术检测细胞凋亡百分比。结果:MTT结果提示,与对照