【摘 要】
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目的:探讨神经母细胞瘤细胞株IMR-32细胞冻融抗原致敏的树突状细胞(dendritic cells,DC)与细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cells,CIK)共培养后,对IMR-32细胞
【机 构】
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郑州市儿童医院血液肿瘤科 450053
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目的:探讨神经母细胞瘤细胞株IMR-32细胞冻融抗原致敏的树突状细胞(dendritic cells,DC)与细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cells,CIK)共培养后,对IMR-32细胞的杀伤作用.
方法:取健康人外周血单个核细胞,加入不同细胞因子培养DC及CIK细胞,第3天用IMR-32细胞冻融抗原致敏DC并于第7天DC与CIK共培养,分为CIK组,DC-CIK组和DC-Ag-C1K组.第7天倒置显微镜观察DC及CIK细胞形态,并观察3组细胞在共培养后的增值情况.流式细胞仪检测DC第3、7天及CIK细胞第7、15天表型变化.CFSE/PI法检测3组效应细胞在不同效靶比下对IMR-32细胞的杀伤作用,以及效应细胞联合顺铂对IMR-32细胞的杀伤作用.
结果:经过培养的DC呈现出典型的“树突状”结构,CIK细胞则聚集成团。培养至第15天时,DC-Ag-CIK和DC-CIK组的细胞数绝对值明显高于CIK组(P<0.05).经过7d的培养,DC细胞表型CD80、CD83、CD86的表达率均明显高于第3天时的DC细胞(P<0.05)。第15天的各组CIK细胞的细胞表型均明显高于第7天未与DC共培养时的CIK细胞(P<0.05),而在第15天的CIK组、DC-CIK组及Ag-DC-CIK组中,Ag-DC-CIK组的CD3+CD56+及CD3+CD8+表达率均明显高于CIK组及DC-CIK组(P<0.05)。
结论:冻融抗原致敏的DC与CIK共培养后对神经母细胞瘤细胞具有明显的杀伤作用,与顺铂联合作用后可以产生明显的协同杀瘤作用。
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