【摘 要】
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沙丁胺醇(SAL)是一种苯乙醇胺类β2-激动剂,在畜禽养殖业存在被当做"瘦肉精"非法滥用现象.作为一种手性分子,SAL的两个对映体在与受体结合时表现出较大差异.因此本研究制备消旋及左旋SAL兔多克隆抗体,建立SAL抗体的间接竞争酶联免疫检测方法(icELISA).消旋SAL icELISA线性检测范围为0.25-22.12 ng mL-1,IC50为2.36 ng mL-1；左旋SAL icELI
【出 处】
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2016第五届中国食品安全高峰论坛
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沙丁胺醇(SAL)是一种苯乙醇胺类β2-激动剂,在畜禽养殖业存在被当做"瘦肉精"非法滥用现象.作为一种手性分子,SAL的两个对映体在与受体结合时表现出较大差异.因此本研究制备消旋及左旋SAL兔多克隆抗体,建立SAL抗体的间接竞争酶联免疫检测方法(icELISA).消旋SAL icELISA线性检测范围为0.25-22.12 ng mL-1,IC50为2.36 ng mL-1；左旋SAL icELISA线性检测范围为0.95-56.45 ng mL-1,IC50为7.34 ng mL-1.两株抗体分别与44种β-激动剂进行了交叉反应,其中有15种与两株抗体的交叉反应率＞5％.引入定量构效关系(3D QSAR)模拟方法对交叉反应结果进行分析.研究发现抗体与小分子的结合受多个结合位点的影响.其中,苯环l号位上氨基端所连接的异丙基,叔丁基及戊基所导致的疏水场作用与交叉反应率正相关；而苯环3,5号位所连官能团的电负性增大,则可直接导致交叉反应率的提高；消旋抗体对手性对映体的识别并不均等,对右旋体的识别能力优于左旋体.对左旋抗体识别模型的分析发现,手性中心羟基与结合位点的距离及其对疏水作用的影响是左旋抗体对左旋体识别能力优于右旋体的主要原因.
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