【摘 要】
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实时荧光定量PCR(qRT-PCR)是目前研究基因定量表达的重要方法,根据特定实验材料及条件选择qRT-PCR分析中合适的内参基因对于准确校正目的基因的表达至关重要.本研究以不同组织、不同种子发育时期、低温和高盐逆境处理的花生为材料,利用qRT-PCR技术探讨了14个内参基因的表达情况,各内参基因均能特异扩增并显示较高的扩增效率.经geNorm和NormFinder程序统计学计算处理,综合分析结果
【机 构】
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山东省花生研究所,山东青岛,266100 青岛中科院生物能源与过程研究所,山东青岛,266101
【出 处】
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中国作物学会油料作物专业委员会第七次会员代表大会暨学术年会
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实时荧光定量PCR(qRT-PCR)是目前研究基因定量表达的重要方法,根据特定实验材料及条件选择qRT-PCR分析中合适的内参基因对于准确校正目的基因的表达至关重要.本研究以不同组织、不同种子发育时期、低温和高盐逆境处理的花生为材料,利用qRT-PCR技术探讨了14个内参基因的表达情况,各内参基因均能特异扩增并显示较高的扩增效率.经geNorm和NormFinder程序统计学计算处理,综合分析结果显示,在所有的样本中UKN1,UKN2,TUA5和ACT11综合表现比较稳定.5个内参基因ACT11,TUA5,UKN2,PEPKR1和TIP41的组合对于不同组织的表达分析最为合适,而TUA5和UKN1组合对于种子不同发育时期的表达分析最为合适.对于低温处理,TUA5和EF1b表达比较稳定.TUA5和UKN2在高盐胁迫的叶片中表达稳定,HDC和UKN1在高盐处理的根中表达稳定.C2H2锌指蛋白AhZFP1用来验证了我们选择的特定条件下稳定表达的内参基因.本研究结果对花生中关键基因的定量表达分析具有重要的实用价值.
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