【摘 要】
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目的 近年来的研究表明,let-7在神经细胞分化的过程中表达增加,提示let-7家族可能参与调控神经干细胞(neural stem cells,NSCs)的分化.但mir-let-7f在NSCs分化中的作用尚未见报道.本研究观察mir-let-7f在大鼠NSCs分化过程中表达及对NSCs分化的调控作用.方法 取1日龄、8日龄、14日龄SD大鼠左侧脑组织,实时荧光定量PCR法(Q-PCR)检测mir
【机 构】
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中南大学湘雅医院儿科,湖南 长沙 410008 湖南省人民医院儿科,湖南 长沙 410008
【出 处】
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庆祝中国当代儿科杂志创刊15周年大会暨当代儿科论坛
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目的 近年来的研究表明,let-7在神经细胞分化的过程中表达增加,提示let-7家族可能参与调控神经干细胞(neural stem cells,NSCs)的分化.但mir-let-7f在NSCs分化中的作用尚未见报道.本研究观察mir-let-7f在大鼠NSCs分化过程中表达及对NSCs分化的调控作用.方法 取1日龄、8日龄、14日龄SD大鼠左侧脑组织,实时荧光定量PCR法(Q-PCR)检测mir-let-7f的表达,Western blot法检测nestin、β-tubulin(tuj1)、GFAP的表达.分离培养胎鼠脑组织NSCs,构建大鼠mir-let-7f Inhibitor及mir-let-7f-1慢病毒载体,体外转染胎鼠NSCs,并诱导分化,分为对照组、空载体组、let-7f Inhibitor组(下调基因)、let-7f-1组(上调基因).诱导分化0d、3d、5d、7d,相同方法检测mir-let-7f、nestin、tuj1、GFAP的表达.结果 随着日龄的增加,SD大鼠脑组织nestin的表达减少,mir-let-7f、GFAP、tuj1的表达增加,差异有统计学意义(P＜0.05)；随着胎鼠NSCs诱导分化天数的延长,nestin的表达逐渐升高,明显低于上一分化组(P＜0.05),mir-let-7f、tuj1、GFAP的表达逐渐升高,明显高于上一分化组(P＜0.05)；而let-7f Inhibitor组nestin表达量明显高于其余三组(P＜0.05),let-7f-1组tuj1、GFAP的表达明显高于其余三组(P＜0.05).结论 mir-let-7f的表达随NSCs分化增多而增高,下调mir-let-7f的表达抑制NSCs分化,而上调mir-let-7f的表达则促进NSCs分化,提示mir-let-7f参与调控大鼠NSCs分化过程,有促进分化的作用.
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