【摘 要】
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目的 探讨氧化应激状态下,IGF-1对新生大鼠皮层神经细胞生存和凋亡的保护作用及其时间窗.方法 建立原代培养的新生大鼠大脑皮层各种神经细胞氧化应激模型,随机分为IGF-1干预组和对照组,检测细胞上清液LDH浓度,MTT法检测细胞的存活状态,Western Blot检测细胞内活性Akt(P-Akt(Ser473))的表达.结果 (1)不同浓度H2O2处理细胞24小时后,大脑皮层神经元细胞,少突胶质细
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科,湖北 武汉 430030
【出 处】
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庆祝中国当代儿科杂志创刊15周年大会暨当代儿科论坛
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目的 探讨氧化应激状态下,IGF-1对新生大鼠皮层神经细胞生存和凋亡的保护作用及其时间窗.方法 建立原代培养的新生大鼠大脑皮层各种神经细胞氧化应激模型,随机分为IGF-1干预组和对照组,检测细胞上清液LDH浓度,MTT法检测细胞的存活状态,Western Blot检测细胞内活性Akt(P-Akt(Ser473))的表达.结果 (1)不同浓度H2O2处理细胞24小时后,大脑皮层神经元细胞,少突胶质细胞,星形胶质细胞LDH均有升高、MTT均有降低,但较之于少突胶质细胞和星形胶质细胞,神经元细胞LDH上升及MTT下降更为显著,具有统计学意义(P<0.01).(2)不同浓度的H2 O2处理皮层神经元细胞5 min后,相比于未经H2 O2处理组,可见磷酸化Akt(Ser473)呈剂量依赖性降低(P<0.01),而经不同浓度的H2 O2处理1h后,相比于未经H2 O2处理组,磷酸化Akt(Ser473)未见明显下降(P>0.05).(3)不同浓度的H2 O2处理皮层神经元细胞5 min,接着加入25 ng/mL的IGF-1,相比于未经H2 O2处理组,可见磷酸化Akt(Ser473)呈剂量依赖性降低(P<0.01),而经不同浓度的H2 O2处理1h,接着加入25 ng/mL的IGF-1,相比于未经H2O2处理组,磷酸化Akt(Ser473)未见明显下降(P>0.05).结论 大脑皮层神经元细胞对氧化应激损伤异常敏感;IGF-1对皮层神经元细胞氧化应激损伤的保护作用存在时间窗.
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