【摘 要】
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目的:牙发育过程依赖于上皮与间充质的相互诱导作用。目前已知具有成牙诱导信号的牙间充质可以诱导非牙源性上皮进行牙向分化。本课题拟研究解离后的人牙胚间充质细胞是否还具有成牙诱导能力,并比较成人牙间充质成分的成牙诱导能力。方法:以体外培养的人胚口腔上皮细胞,人胚牙间充质细胞及成人牙髓细胞为实验对象。人胚口腔上皮细胞分别与人胚牙间充质细胞或成人牙髓细胞进行共培养。本实验采用二维共培养及三维Transwel
【机 构】
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口腔疾病研究国家重点实验室,(四川大学);四川大学华西口腔医学院牙体牙髓病科 美国加州大学旧金山分
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目的:牙发育过程依赖于上皮与间充质的相互诱导作用。目前已知具有成牙诱导信号的牙间充质可以诱导非牙源性上皮进行牙向分化。本课题拟研究解离后的人牙胚间充质细胞是否还具有成牙诱导能力,并比较成人牙间充质成分的成牙诱导能力。方法:以体外培养的人胚口腔上皮细胞,人胚牙间充质细胞及成人牙髓细胞为实验对象。人胚口腔上皮细胞分别与人胚牙间充质细胞或成人牙髓细胞进行共培养。本实验采用二维共培养及三维Transwell系统共培养。二维共培养1周后收集细胞,定量PCR检测相关分化基因表达水平改变情况。三维共培养4周后取共培养复合物进行形态学及组织学检测。结果:人胚口腔上皮细胞与人胚牙间充质细胞共培养后具有显著性的成釉蛋白基因表达上调。与人胚牙间充质细胞三维共培养后的人胚口腔上皮细胞形成腺管样结构并具有成釉蛋白阳性染色。与成人牙髓细胞共培养后,人胚口腔上皮细胞不具备相似的改变。结论:本实验结果提示在丧失了空间信号之后的钟状期人胚牙间充质细胞仍然保留了成牙诱导信号。人胚口腔上皮细胞在与其共培养之后可以被诱导分化为具有成釉细胞样细胞。
其他文献
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目的:通过胞内外类型识别受体特异配体急性和慢性刺激牙髓细胞,探讨跨膜受体TLR2/TLR4和胞质受体NOD1/NOD2表达的相互影响及NALP3炎症体和下游分子Caspase-1,促炎因子(IL-1β,IL-6,IL-8)表达情况,初步评估牙髓细胞对病原菌胞内外感染的的分子识别机制.方法:选用胞内外类型识别受体特异配体MDP/LPS刺激牙髓细胞不同时间后,采用real-time PCR,Weste
目的:本研究探讨Th17和Tregs平衡失调与大鼠根尖周炎的炎症反应及牙槽骨 破坏的关系。方法:选取5周龄雄性Wistar大鼠(n=20),实验组用球钻将下颌第1磨牙开髓,根管锉清理牙髓,髓腔暴露于口腔中,14d、28d后断颈处死。以未开髓的上颌第1磨牙作为对照组。取上下颌骨,采用Micro-CT观察根尖病损的形成情况;部分标本固定,脱钙,冰冻切片,组织学方法观察根尖病损的特点,采用抗CD68、l
目的:探讨碱性成纤维细胞因子(Basic fibroblast growth factor,bFGF)对根尖牙乳头干细胞(Stem cells from the apical papilla,SCAP)成脂分化能力的影口向.方法:将SCAP以2×1 04个细胞接种至60mm培养皿,15% FBS的a-MEM培养至细胞达到80%融合后分别以含或不含bFGF(5 ng/mL)成脂诱导液诱导,培养3w后
目的:研究成牙本质细胞中BMP2调控DSPP基因转录的具体分子机制.方法:构建含有不同长度DSPP基因启动子片段的荧光素酶报告质粒:p1318、p591和p318,以及DLX3、OSX高表达质粒:pcDNA-DLX3和pcDNA-OSX.使用重组BMP2诱导MD10-F2细胞不同时间段后,western检测细胞内DLX3、OSX和DSP表达.高表达DLX3、OSX以及使用DLX3 SiRNA抑制D
目的:研究CpG ODN对成牙本质细胞内MMP-13基因表达的影响,探讨CpG ODN调控MMP-13基因表达的细胞内信号途径。方法:培养成牙本质细胞样细胞OLC,RT-PCR检测TLR9和MMP-13的表达。定量PCR观察CpG ODN对OLC细胞内MMP13基因表达的时间和浓度效应。分别瞬时转染TLR9、MyD88或IκBα突变载体观察LPS是否通过TLR9/MyD88/IKK信号途径调控DC
目的 探讨人牙周膜成纤维细胞在感染状态下,热刺激对其核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)及骨保护素(OPG)表达的影响.材料方法 采用体外原代培养的人牙周膜成纤维细胞,分别接种在35mm培养皿中进行实验.实验分为两组:一组细胞直接接受不同温度(39℃,43℃,47℃,50℃)的热刺激5min;另一组细胞预先接受10ng/ml E.coli LPS刺激24h,然后再接受不同温度的热刺激(39℃
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众所周知,磷离子在牙本质的矿化过程中具有重要作用,但其在牙本质形成过程中的作用机制并不清楚。目的:探讨磷离子对牙本质形成的影响及可能的机理。方法:采用Dmp1基因敲除鼠这一低磷模型,通过注射FGF23抗体,恢复血磷水平后观察生后28天小鼠牙本质的改变及牙本质涎磷蛋白(DSPP)的表达。结果:生后28天,Dmp1基因敲除鼠牙齿髓腔较正常对照大,牙本质变薄,前期牙本质变厚,DSPP在成牙本质细牙髓细胞
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