农杆菌介导asr基因转化花生及其转基因植株鉴定

来源 :中国作物学会油料作物专业委员会第六次代表大会暨学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:luoqh163
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采用RT-PCR方法从香蕉中克隆出asr基因并与pCAMBIA1301载体定向连接,构建植物表达载体pCAMBIA130-asr。以花生栽培种珍珠红的种子来源的原胚轴为外植体,采用农杆菌介导的遗传转化方法,用植物转化载体pCAMBIA1301-asr转化花生,并采用潮霉素筛选和PCR方法对转化植株进行鉴定,同时采用GUS组织化学染色方法对阳性转基因植株进行进一步的鉴定。PCR鉴定结果表明,50株潮霉素抗性植株中有26株能扩增出预期的目的条段,阳性率为52%。组织化学染色结果显示,gus基因能正常表达,进一步证明已成功转化。对转基因植株中叶脉部位染色较深以及部分经潮霉素筛选和PCR鉴定为阳性的植株GUS染色呈阴性的原因进行了讨论。
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