利用花粉介导遗传转化获得抗除草剂转基因油菜

• 作 者: 邹智;吴刚;肖玲;武玉花;卢长明;
• 机 构: 中国农业科学院油料作物研究所,基因工程与转基因安全室,湖北 武汉 430062
• 出 处: 中国作物学会油料作物专业委员会第六次代表大会暨学术年会
• 发表日期: 2008年期

农杆菌LBA4404经As活化后，均匀涂布在特定的花粉萌发培养基上。然后在该培养基上均匀散上一层刚收集的油菜(Brassica napus L.)花粉，待其离体萌发后再给去雄植株人工授粉，套袋、收获种子、进行PVT筛选。
结果表明，萌发培养基中的蔗糖浓度明显影响油菜花粉的离体萌发能力、受体的结实率与转化率，浓度梯度为0、10％、15％、20％、25％时，不加蔗糖，绝大多数花粉破裂；20％以下随着蔗糖浓度的增加，花粉破裂率降低、萌发率和结实率明显提高；25％时花粉萌发率虽然有所降低，但结实率最高，为5.29欧粒/荚，PPT筛选和PCR分析结果表明该浓度的处理成功获得了3株转基因油菜，平均转化效率为0.31％。本文首次报道了以农杆菌作为DNA供体，利用花粉介导法转化油菜获得成功。