不同压力刺激耦合VEGF基因转染促进骨折愈合的试验研究

来源 :中国康复医学会修复重建外科专业委员会第19次全国学术交流会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jiangyingzhou
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  [目的]研究骨折端压力刺激耦合外源性VEGF基因转染对骨折愈合的影响,寻求生物力学与基因工程相结合的有效方法.[方法]通过大肠杆菌和RPM(R)4G质粒纯化试剂盒进行pBLAST49-rVEGF质粒的扩增、提取、纯化和鉴定;设计制作兔胫骨骨折动物模型的外固定加压装置,并进行预试验;建立48只兔胫骨骨折外固定模型,随机分成4组,分别给予ON(A组),18N(B组),18N+骨膜下注射Lipofectamine (100μl)(C组),ON+骨膜下注射Lipofectamine (100μl)(D组).通过观察大体标本,X光摄片,HE和MASSON染色,VEGF型胶原免疫组化染色,生物力学三点抗弯曲试验,抗压缩试验,观察其对骨折愈合的影响.[结果]C组术后3周骨折端开始出现大量肉芽组织生长,术后9周,D组骨折已基本愈合,骨小梁重新排列成板层状,骨髓腔已再通.MASSON染色和Ⅰ型胶原免疫组化染色后,采用Mias图像分析仪比较起IOD值结果,也可见到C组峰值出现较早,比A、B、D组提前1-2周,且高峰时间延长.各组术后不同时期三点抗弯曲力学试验结果显示,C组抗弯曲正应力值、最大弯矩以及抗弯刚度最大,表明愈合质量最好,和其他各组比较具有显著性差异,P<0.05.各组术后不同时期抗压缩力学试验结果显示,C组最大抗压缩力及弹性模量最强,和其他各组比较具有显著性差异,P<0.05.[结论]施以3/4动物体重的压力耦合骨膜下注射VEGF质粒(100μg)、,能极显著地促进骨折的愈合,二者间具有协同作用.
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