TaqMan荧光定量PCR检测鸡产蛋下降综合征病毒方法的建立及应用

• 作 者: 马震原[1]李刚[2]李文超[2]郭宇飞[3]
• 机 构: 四川农业大学动物医学院 四川雅安 625014 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部兽用药物与兽医生物技术北京科学观测实验站 北京 100193
• 出 处: 2012第四届中国兽药大会
• 发表日期: 2012年期

　　根据GenBank公布的鸡产蛋下降综合征病毒六邻体蛋白基因的高度保守序列，设计了2对特异性引物和1条TaqMan探针。以构建的阳性重组质粒为标准品，绘制标准曲线，建立了一种快速检测鸡产蛋下降综合征病毒的TaqMan荧光实时定量PCR方法。该方法最小检出量达1 0 copies／laL，在1.0×102～1.0×108copies／μL检测范围间有良好的的线性关系，特异性、稳定性和重复性也较好。用建立的本方法分别对感染鸡产蛋下降综合征病毒鸡群的产蛋分离物和人工感染该病毒小鼠10d后的组织中的病毒含量进行检测，与普通PCR相比，该荧光实时定量PCR方法具有更高的敏感性，可更好地用于鸡产蛋下降综合征病毒的临床检测。