【摘 要】
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目的：构建HER2基因真核表达载体，研究其对肿瘤生长的抑制作用。 方法：通过RT-PCR方法从HER-2+SKBR3细胞株中获得HER-2基因胞外段编码区cDNA，构建pRCCMV-信号肽-hHER2-ECD真核
【机 构】
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第四军医大学生物技术中心, 陕西西安710033
【出 处】
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2008中国药学会学术年会暨第八届中国药师周
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目的：构建HER2基因真核表达载体，研究其对肿瘤生长的抑制作用。
方法：通过RT-PCR方法从HER-2+SKBR3细胞株中获得HER-2基因胞外段编码区cDNA，构建pRCCMV-信号肽-hHER2-ECD真核载体，于大肠杆菌DH5a中进行扩增；用获得的质粒免疫小鼠，ELISA法和ELISPOT法分别检测体液及细胞免疫情况，然后用EMT-6细胞接种肿瘤，观察肿瘤生长情况。
结果：构建的pRC-CMV-信号肽-hHER2-ECD真核载体经酶切和DNA测序分析，结果表明该基因的序列与设计的序列完全相同。pRC-CMV-信号肽-HER2真核表达质粒转染细胞后，目的基因在mRNA水平的表达与预期结果一致。获得的质粒能够引起较低的体液免疫，但其可诱导较高的T细胞反应，并且可明显降低小鼠成瘤率。
结论：构建的HER2基因真核表达载体可在细胞中表达且对小鼠实体瘤的生长具有一定的抑制作用。
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