【摘 要】
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本文采用RT-PCR和RACE法,克隆了胡子鲇脑型芳香化酶基因P450aromB,使用荧光实时定量RT-PCR检测其在前脑、下丘脑、脑垂体、肝脏、精巢和卵巢等6种组织,以及性腺分化前后(出膜后12-30d) mRNA表达.结果表明:P450aromB cDNA全长2347bp,5端非编码区219 bp,3端(不包括poly (A)) 596bp,开放阅读框(ORF) 1503 bp,编码500个氨
【机 构】
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广东海洋大学水产学院,湛江524025
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本文采用RT-PCR和RACE法,克隆了胡子鲇脑型芳香化酶基因P450aromB,使用荧光实时定量RT-PCR检测其在前脑、下丘脑、脑垂体、肝脏、精巢和卵巢等6种组织,以及性腺分化前后(出膜后12-30d) mRNA表达.结果表明:P450aromB cDNA全长2347bp,5端非编码区219 bp,3端(不包括poly (A)) 596bp,开放阅读框(ORF) 1503 bp,编码500个氨基酸,推测其蛋白质分子量为56.388kDa.序列分析及分子系统进化树结果表明,胡子鲇P450arom为脑型芳香化酶,且胡子鲇与非洲鲇亲缘关系最近,与斑马鱼、稀有鮈鲫、鲤鱼和鲫鱼亲缘关系最远.荧光实时定量RT-PCR结果显示,P450aromB在胡子鲇上述检测组织中均有表达,以下丘脑中表达量最高,肝脏和性腺最低,且在脑部存在明显的性别差异(P<0.05).此外,在胡子鲇性分化前P450aromB即开始表达,且分化前后表达量无显著性差异.结果暗示P450aromB可能不是引起胡子鲇性腺分化的直接因素,但可能通过"下丘脑一垂体一性腺轴"对此过程产生间接影响.
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