肝豆汤改良方对Wilson's病模型TX乳鼠神经元内ASM/CER信号通路的分子调控机制研究

来源 :2016中国医师协会中西医结合医师大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sjappleshujin
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  目的:目的 探讨肝豆汤改良方调控TX乳鼠神经元内ASM/CER信号通路的分子靶点并观察其相应的调控机制.方法 采用流式细胞仪检测不同剂量含肝豆汤改良方兔血清对DL、TX乳鼠神经元ROS释放量的影响;利用RT-qPCR技术观察肝豆汤改良方对ASM/CER信号通路相关基因表达水平的影响;利用Western blot技术观察肝豆汤改良方对ASM/CER信号通路相关蛋白表达水平的影响.结果 流式细胞仪检测发现与对照组相比,模型组荧光强度显著增加(P<0.01);与模型组相比,含肝豆汤改良方兔血清作用24 h后,可显著降低ROS的荧光强度(P<0.01),并呈一定浓度依赖性;RT-qPCR法检测结果发现肝豆汤改良方可显著降低TX乳鼠神经元内ASM、Cer、PKC、JNK、Cyt C、Caspase 9及Caspase 3基因的表达水平(P<0.01);Western-Blot法检测结果可知肝豆汤改良方可显著降低TX乳鼠神经元内ASM、Cer、PKC、JNK、Cyt C、Caspase 9及Caspase 3蛋白的表达(P<0.01).结论 肝豆汤改良方可能是通过促进过量铜排出,降低TX乳鼠神经元ROS的释放量从而抑制神经元内ASM、Cer、PKC、JNK、Cyt C、Caspase 9及Caspase 3蛋白及基因的表达,减轻高铜产生的氧化损伤对神经元的损伤作用.肝豆汤改良方可通过减少脑内铜含量进而调控ASM/CER信号通路达到减轻高铜诱导的神经元损伤的治疗效果.
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