【摘 要】
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目的:研究apelin对人成骨细胞凋亡的作用。
方法:用茜素红染色观察原代培养的人成骨细胞矿化结节的形成.碱性磷酸酶(ALP)用ELISA检测;骨钙素(OC)用放射免疫测定法测定;Ⅰ
【机 构】
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410011,长沙市,中南大学湘雅二医院代谢内分泌研究所
【出 处】
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2008国际骨质疏松与骨矿盐疾病学术会议
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目的:研究apelin对人成骨细胞凋亡的作用。
方法:用茜素红染色观察原代培养的人成骨细胞矿化结节的形成.碱性磷酸酶(ALP)用ELISA检测;骨钙素(OC)用放射免疫测定法测定;Ⅰ型胶原用ELISA法检测.用ELISA法检测细胞凋亡.Bcl-2,Bax,caspase-3,cytochmme C,P-Akt,Akt用Western blot检测.PI3-K p85α用免疫沉淀法检测.用小分子RNA干扰技术(siRNAs)抑制APJ表达,联合PI3-K信号转导阻断剂LY294002及Akt信号转导阻断剂HIMO干预,以观察Apelin对成骨细胞凋亡的作用及信号转导.
结果:Apelin能抑制无血清诱导的人成骨细胞凋亡,siRNAs转染阻断APJ表达可消除此效应.Apelin干预可诱导入成骨细胞Bcl-2蛋白质表达,抑制Bax蛋白质表达和Cytochrome C的分泌及caspase-3的裂解活化.Apelin可诱导人成骨细胞PI3-K及Akt磷酸化;siRNAs转染沉默APJ可消除此效应;PI3-K信号转导阻断剂LY294002或Akt阻断剂HIMO能消除Apelin对人成骨细胞Akt的活化作用;LY294002或HIMO也能阻断Apelin对人成骨细胞抑制凋亡作用。
结论:Apelin可抑制人成骨细胞的凋亡;Apelin通过APJ/PI3-K/Akt信号通路介导参与对成骨细胞凋亡的调节.
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