【摘 要】
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本研究以模型糖蛋白-鸡卵清蛋白(OVA)为研究对象，采用糖苷内切酶PNGaseF释放N-糖链。采用石墨化碳SPE柱富集N-糖链，并建立N-糖链的二维色谱分离体系，实现N-糖链及其异构体的高效
【机 构】
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中国科学院大连物理化学研究所,分离分析化学重点实验室,大连,116023
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本研究以模型糖蛋白-鸡卵清蛋白(OVA)为研究对象，采用糖苷内切酶PNGaseF释放N-糖链。采用石墨化碳SPE柱富集N-糖链，并建立N-糖链的二维色谱分离体系，实现N-糖链及其异构体的高效分离和高通量制备。通过基质辅助激光解离质谱分析，共得到23个N-糖链（包含异构体8对），含量大于1mg的有3个，大于0.5g小于lg的有2个，含量最少为微克级；样品纯度均在95％以上。结构分析采用串联多级质谱结合糖芯片分析法。通过分析可知，卵清蛋白的糖型为高甘露型和混合型，结构明确的异构体有3对。本研究不仅丰富了糖链样品库，同时也可为其他糖链的质谱解析规律提供理论依据。
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