许氏平鮋热休克蛋白基因克隆及低氧处理对其mRNA表达影响分析

来源 :2012年全国博生研究生学术论坛——可持续的水产养殖:理论与实践 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xinxin3690
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  采用RACE克隆和基因克隆技术对许氏平鮋(Sebastes schlegeli)热休克蛋白(Heat shock protein,HSP70)基因进行了克隆.共获得cDNA部分序列1669bp,编码523个氨基酸.同源蛋白比较结果显示,许氏平鮋HSP70序列与其他物种具有很高的相似性.与鱼类氨基酸进行比较,发现与尖吻鲈鱼的相似度最高,为72.77%.RT-PCR组织表达分析结果显示,该基因在雄鱼的心脏、脾、盲囊、脂肪、鳃和肠中都有表达,在头肾中表达量最高,在肝脏、精巢、胃和脑中的表达量较低;在雌鱼中,该基因在心脏、脾、头肾、卵巢、肾和脑中有表达,在肝脏中表达量最高,在盲囊和鳃中表达量较低.采用荧光实时定量PCR分析许氏平鮋HSP70基因在脑和性腺中的周期表达,发现该基因在性腺的发育早期表达量较高;在脑中,HSP70分别在雌鱼Ⅱ期和雄鱼Ⅲ期的表达量最丰富.对雌鱼进行低氧处理后,荧光实时定量分析发现在低氧处理30分钟后(dissolved oxygen: 4.08±0.23mg/1),卵巢中HSP70基因表达量最高;处理1小时后,在中低氧组(dissolved oxygen: 3.90±0.21mg/1)中卵巢HSP70基因表达量最高.
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