【摘 要】
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本实验首先利用椎体虫基因组作为模板，试剂盒抽提质粒作为载体，用聚合酶链反应法(PCR)扩增目的基因，用琼脂糖凝胶电泳进行胶回收从而回收目的DNA片段。其次采用EcoRI限制性内切酶和NdeI限制性内切酶进行双酶切，再用琼脂糖凝胶电泳胶回收酶切产物。然后使用T4连接酶过夜连接，之后用制备好的DH5α感受态细胞进行转化，转化好的产物均匀涂布在LB固体培养基上过夜培养，第二天挑取单菌落摇菌，抽提重组质粒
【机 构】
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上海海洋大学 上海市浦东新区沪城环路999号 201306
【出 处】
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第十届世界华人虾蟹养殖研讨会暨2016年中国河蟹产业发展高峰论坛
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本实验首先利用椎体虫基因组作为模板，试剂盒抽提质粒作为载体，用聚合酶链反应法(PCR)扩增目的基因，用琼脂糖凝胶电泳进行胶回收从而回收目的DNA片段。其次采用EcoRI限制性内切酶和NdeI限制性内切酶进行双酶切，再用琼脂糖凝胶电泳胶回收酶切产物。然后使用T4连接酶过夜连接，之后用制备好的DH5α感受态细胞进行转化，转化好的产物均匀涂布在LB固体培养基上过夜培养，第二天挑取单菌落摇菌，抽提重组质粒。最后对抽提出的重组质粒进行酶切鉴定。实验结果经酶切鉴定证实，重组质粒构建成功。
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采用氨基酸全自动分析仪、气质联用仪、电感耦合等离子体发射光谱仪、原子荧光分光光度计等对速冻蟹黄粉的粗蛋白、氨基酸、粗脂肪、脂肪酸、矿物质元素的含量进行了测定,并分析评价速冻蟹黄粉的各种营养成分.结果 表明：速冻蟹黄粉粗蛋白质含量为15.61％,至少含有16种氨基酸,必需氨基酸含量较高,占氨基酸总量的37.61％,4种致鲜氨基酸占氨基酸总量52.40％；粗脂肪含量为45.09％,不饱和脂肪酸含量丰富
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