【摘 要】
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本研究用小鼠巨噬细胞RAW264.7作为模型,分析旋毛虫ES抗原和Hsp70对巨噬细胞的活化能力,并观察LPS/Pam3CSK4对已活化的巨噬细胞免疫调节作用.应用半定量PCR方法检测发现,不同浓度的旋毛虫ES抗原,其对RAW264.7细胞上的TLR2/4 mRNA诱导表达存在着明显变化,在ES抗原浓度为15μg/mL时,TLR2/4 mRNA表达量较其他组高,与对照组相比差异显著(P＜0.05)
【机 构】
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东北农业大学动物医学学院 黑龙江哈尔滨150030
【出 处】
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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第七次代表大会暨第十二次学术研讨会
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本研究用小鼠巨噬细胞RAW264.7作为模型,分析旋毛虫ES抗原和Hsp70对巨噬细胞的活化能力,并观察LPS/Pam3CSK4对已活化的巨噬细胞免疫调节作用.应用半定量PCR方法检测发现,不同浓度的旋毛虫ES抗原,其对RAW264.7细胞上的TLR2/4 mRNA诱导表达存在着明显变化,在ES抗原浓度为15μg/mL时,TLR2/4 mRNA表达量较其他组高,与对照组相比差异显著(P＜0.05)；确定浓度的ES抗原对RAW264.7细胞上TLR2/4基因表达存在时间依赖性,在ES抗原(15μg/mL)作用18h时,TLR2/4 mRNA有较高水平的表达,且与空白组之间存在显著性差异(P＜0.05).用同样方法检测旋毛虫Hsp70对RAW264.7细胞的作用,研究表明,RAW264.7细胞对Hsp70存在剂量依赖性,Hsp70作用浓度为5μg/mL时有相似的结论.15μg/mL的ES抗原作用RAW264.7细胞18h后,再经LPS(10ng/mL)刺激12 h.结果表明,经ES抗原预刺激后的巨噬细胞对LPS再次刺激的反应性明显降低,其表现为巨噬细胞上的TLR2/4 mRNA表达量下降.研究结果证明,适当作用时间和浓度的旋毛虫ES抗原和Hsp70能够活化静息状态下的巨噬细胞；在旋毛虫ES抗原和HspT0持续作用下,巨噬细胞对LPS再刺激的反应性明显降低,表现为TLR2、TLR4和胞内信号分子的表达下调,说明旋毛虫ES抗原可诱导巨噬细胞处于类似于内毒素诱导的免疫抑制.
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